k418 - page 155

ВестникНОМУС. Сборникматериалов конкурса литературных обзоров-2012
155
жидкостях человека. При исследовании солей гамма-гидроксимасляной
кислоты используют получение силильных производных этой кислоты с
помощью модифицирующего агента – бис-(триметилсилил)-
трифторацетамида (BSTFA).
Приведёмосновныеприёмыпробоподготовки:
1) Растворы солей ГОМК упаривают досуха при температуре не выше
90°С, твердые вещества исследуют в нативном виде. К сухому остатку
прибавляют 25%-ный раствор BSTFA в ацетонитриле. Смесь выдерживают
при 70°С в течение 30 миниисследуют на газовомхроматографе.
2) При исследовании гамма-бутиролактона каплю исследуемой
жидкости растворяют в 0,5 мл хлороформа , перемешивают, полученную
смесьисследуют без дополнительной обработки силирующимреагентом .
3) Для того, что бы избежать образования бутиролактона из гамма-
гидроксибутирата в кислой среде, к моче добавляют 0,1 моль/л раствор
NaOH в метаноле. При этом значение рН среды не должно выходить за
пределы 13,0-14,0.
4) Для лучшего экстрагирования натрия оксибутирата из
биологическихжидкостейдобавляют кристаллический Na2SO4 .
5) Мочевину, как мешающее определению вещество, из биологических
жидкостей удаляют припомощи уреазы .
6) Среднийобъёмпробы вметодеГХиГХ-МС составляет 1 мкл.
Газохроматографическое определение проводят при следующих
условиях анализа:
- колонка кварцевая капиллярная длиной 10-30 м и диаметром 0,2-0,32
мм, сметилсиликоновой стационарнойфазой (типа OV-101, SE-30);
- газ-носитель – азот ( гелий), детекторпламенно-ионизационный;
- температура испарителя – 280°С, температура детектора –290°С;
- температура колонкименяется от 100°Сдо 280°С [1, 9, 10].
При анализе методом ГХ-МС с использованием различных методик
получаютмасс-спектры [5], примеры которыхпредставленына рисунке 1:
Рис. 1 – Масс-спектрыпроизводныхоксибутирата