k418 - page 252

ВестникНОМУС
.
Сборникматериалов
конкурса
литературных
обзоров
-2012
252
инвазированных
пациентов
с
признаками
заболевания
гепатобилиарной
системы
,
что может
использоваться
для
прогноза
развития
холангиокарциномы
[36].
Для
первичной
диагностики
инфицирования
описторхозом
путем
обнаружения
ДНК
в
кале
пациентов
возможно
использование
ПЦР
,
которая
обладает
чувствительностью
около
85%.
Стандартные
методы
ПЦР
часто
оказываются
положительными
только
в
тех
случаях
,
когда
они
были
подтверждены
овоскопически
.
По
данной
причине
дальнейшее
развитие
ПЦР
-
диагностики
должно
быть
направлено
на
оптимизацию
процесса
выделения
ДНК
и
повышение
чувствительности
метода
[17].
Это
достигается
использованием
специфических
праймеров
,
созданных
на
основе
части
митохондриального
цитохрома
С
оксидазы
I [18, 31].
Кроме
того
,
возможно
использование
методики
ПЦР
на
основе
геномной
ДНК
для
одновременного
определения
различных
видов
паразитов
семейства
и
других
гельминтозов
тонкой
кишки
[25, 29, 32].
Использование
модификации
ПЦР
с
удалением
ингибиторов
реакции
позволило
значительно
повысить
чувствительность
и
специфичность
метода
в
сравнении
со
стандартными
протоколами
и
использованием
моноклональных
антител
для
идентификации
антигена
описторхисов
в
кале
[20].
В
исследовании
К
.
Р
. Umesha etal. [30]
были
проведены
исследования
,
в
ходе
которых
23
из
30 (76,6%)
микроскопически
отрицательных
образцов
показали
положительный
результат
вПЦР
.
Чувствительность метода
составила
5
яиц
/
грамм
кала
.
При
использовании
олигонуклеотидных
праймеров
и
зондов
с
флюоресцентной меткой
для
проведенияПЦР
с
детекцией
результата
в
режиме
реального
времени
установлено
,
что
достоверность
работы
тест
-
системы
составляет
около
98%,
а
чувствительность
около
10
3
копий
целевой ДНК
в
1
мл
[6].
Использование
FRET
(
метод
флуоресценции
,
обеспечивающий
возможность
исследования
межмолекулярных
взаимодействий
,
зависящий
от
переноса
энергии
от
одногофлуорофора
к
другому
)
вПЦР
позволило
повысить
чувствительность
и
пропускную
способность
данного метода
.
Диагностическая
чувствительность
,
специфичность
,
точность
,
и
положительные
и
отрицательные прогностические
значения
этогометода
составили
97,5%, 100%,
98,9%, 100%,
и
98,2%
соответственно
.
Процедура
имеет
потенциал
для
диагностики
описторхоза
в
эндемичных
районах
,
для
крупных
исследований
с
1...,242,243,244,245,246,247,248,249,250,251 253,254,255,256,257,258,259,260,261,262,...663
Powered by FlippingBook