38
Принцип метода заключается в измерении скорости образования n-
нитрофенола: n-нитрофенилфосфат +H
2
O –ЩФ --
→
n-нитрофенол+фосфат,
при этом скорость образования n-нитрофенола прямо пропорциональна
активности фермента.
Перед анализом смешивались реагенты № 1 и № 2
в соотношении 4:1.
Исследование проводилось при температуре 37 °С. В кювету фотометра с
толщиной поглощающего слоя 1 см вносились 2 мл рабочего реагента и 0,05
мл исследуемой слюны, тщательно перемешивались, и через 1 мин
измерялась исходная экстинкция при длине волны 405 нм. Замеры
повторялись через 1, 2 и 3 мин. Вычислялась средняя величина изменения
экстинкции за 1 мин – ∆Е/мин.
Расчет проводился по формуле:
Активность щелочной фосфатазы =
3571 × ∆Е/мин,
где ∆Е/мин – средняя величина изменения экстинкции за 1 мин;
3571 – фактор пересчета (Committee…, 1974).
Оптимальная активность щелочной фосфатазы в ротовой жидкости у
детей в возрасте 6-10 лет колеблется от 54 до 114 Ед
/
л (Справочник-
путеводитель…, 2003). Исследование проведено у 261 ребенка в возрасте 7-9
лет (в четырех основных группах – n=209 и группе сравнения – n=52).
2.2.5. Катионно-анионный спектральный капиллярный электрофорез
ротовой жидкости
Измерение массовой концентрации катионов в ротовой жидкости
проводилось методом капиллярного электрофореза при длине волны 254 нм
«Капель-103/103РТ», «Капель-104/104Т» или 267 нм «Капель-105/105М»
(Россия). Спектр изучаемых катионов ротовой жидкости состоял из аммония,
калия, натрия, стронция, бария, магния, лития и кальция. При этом диапазон
измерений (мг/дм³) массовой концентрации катионов колебался в пределах
0,015 до 5000 вкл (табл. 1).