37
Принцип метода заключается в образовании окрашенного комплекса в
щелочной среде кальция с о-крезолфталеин-комплексоном. При этом
интенсивность окраски пропорциональна концентрации кальция в пробе.
Процедура анализа состоит из подготовки трех проб. Опытная проба
готовилась из 1,0 мл реагента № 1, 1,0 мл реагента № 2 и 0,05 мл
исследуемого образца слюны. Калибровочная проба состояла из реагентов
№1 и №2 по 1,0 мл и 0,05 мл калибратора. Контрольная проба
подготавливалась из 1,0 мл реагента № 1 и 1,0 мл реагента № 2, а также 0,05
мл бидистиллированной воды. Все пробы тщательно перемешивались и
инкубировались в течение 5 минут при комнатной температуре. Затем на
автоматическом фотоколориметре измерялась оптическая плотность опытной
и калибровочной проб против контрольной пробы при длине волны 570 нм.
Расчет концентрации кальция в исследуемой слюне проводился по формуле:
С = Е
пробы
/ E
калибр.
×
2,5 ммоль/л,
где Е
пробы
– оптическая плотность опытной пробы;
Е
калибр.
– оптическая плотность калибровочной пробы;
2,5 ммоль/л – концентрация кальция в калибраторе (Barnett R.N., 1973).
Оптимальное содержание кальция в ротовой жидкости у детей в возрасте
7-9 лет колеблется от 0,75 до 3,0 ммоль/л. Исследование проводилось у 261
ребенка.
2.2.4. Определение активности щелочной фосфатазы в ротовой жидкости
Изучение активности щелочной фосфатазы в ротовой жидкости
проводилось с помощью стандартных наборов реагентов «Ольвекс
диагностикум» «Щелочная фосфатаза» (Кат. № 009.004 – 250 мл) на
фотоколориметре марки «Photometer-5010»(Германия). Набор включает
реагент № 1 (диэтиламиновый буфер, магния хлорид, детергенты,
стабилизаторы) и реагент № 2 (n-нитрофенилфосфат).
