17
21.03.03. Москва. О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской
Федерации.).
Ряд исследователей считают, что чувствительность иммунологических тест-систем
составляет 67,8%, что не позволяет использовать их массово для раннего выявления
туберкулеза у населения (Т.И. Морозова с соавт., 2000; В.И. Завалеев, 2000). В.И.Завалеев
считает, что чувствительность ИФА зависит от распространенности туберкулезного
процесса, являясь невысокой при ограниченных формах туберкулеза (очаговый – 66,6%,
туберкулемы – 59,5%, неосложненный туберкулез внутригрудных лимфатических узлов –
56,4%), информативен при диссеминированных и инфильтративных изменениях в легких
неясной этиологии, высокочувствителен при мочеполовом туберкулезе (83,3%). В
исследованиях М.В.Губкиной с соавт. (2002) отмечена низкая чувствительность метода ИФА
(59,6%) у больных туберкулезом внутригрудных лимфоузлов. Они же указывают, что
имеются значительные различия в частоте получения положительных результатов ИФА у
детей и подростков с различными формами заболевания. Положительные результаты
достоверно чаще определялись у больных с легочными процессами (инфильтративный,
очаговый туберкулез) – 69,2±7,4% по сравнению с результатами у больных туберкулезом
внутригрудных лимфоузлов – 38,9±11,8%, число отрицательных ответов ИФА у
инфицированных МБТ было достоверно выше, чем у больных пневмонией (82,4±9,5 и
38,5±9,7%, соответственно), что не позволяет использовать ИФА в качестве скрининг-теста в
целях ранней диагностики туберкулеза у детей и подростков. Получение
ложноположительных результатов ИФА у больных неспецифической пневмонией снижает
специфичность теста (38,5%), в связи, с чем метод не может быть использован в целях
дифференциальной диагностики туберкулеза легких и неспецифической пневмонии (М.Ф.
Губкина с соавт.,2002). В исследованиях Н.В. Юхименко с соавт. (2002) также указывается
на невозможность использования ИФА для дифференциальной диагностики туберкулеза, так
как частота обнаружения антител у больных с неосложненным течением (в 72,7±7,8%)
достоверно не отличается от инфицированных МБТ детей (в 52,5±6,5%). В ряде работ дается
высокая оценка информативности обнаружения в крови противотуберкулезных антител
методом ИФА в случаях первичного выявления туберкулеза (С.В. Некрасов, 1999). В
исследованиях С.В.Некрасова доказано, что уровень противотуберкулезных антител у детей,
инфицированных МБТ достоверно меньше по сравнению с больными туберкулезом
внутригрудных лимфатических узлов, при этом чувствительность ИФА у инфицированных
23,2%, а у больных туберкулезом внутригрудных лимфатических узлов 88,8%.
Преимуществом данного теста является комплексная оценка специфических
иммуноглобулинов класса М, класса G, класса А, что позволяет определить активность
инфекции, ее раннюю стадию или затихающий процесс, а также определить ее реактивацию
или признаки инфицирования.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
ПЦР относится к молекулярно-генетическим
методам исследования и в настоящее время широко используется для обнаружения
M.tuberculosis (отражает факт наличия или отсутствия антигена). Принцип метода состоит в
циклическом повторении трех стадий реакции:
1.
денатурации ДНК при нагревании;
2.
гибридизации искусственно синтезированных олигонуклеотидов с фланговыми
участками цепей амплифицируемого фрагмента ДНК (так называемых «праймеров» или
«затравочных» фрагментов);
3.
синтеза (достройки) цепи фрагмента ДНК с помощью термостабильной ДНК-
полимеразы. Многократное удвоение цепей ДНК (30–40 циклов) позволяет в течение
нескольких часов умножить (амплифицировать) специфический участок ДНК в
геометрической прогрессии, а затем идентифицировать его (при электрофорезе в агарозном
геле в присутствии красителя этидия бромида синтезированный фрагмент ДНК выявляется в
виде светящейся под действием ультрафиолета полосы).