Упрощенная HTML-версия
активности соединений в отношении грамотрицательных возбудителей в качестве контроля
можно использовать азтреонам, полимиксин В.
Для препаратов широкого спектра действия контролем могут быть аминогликозиды,
тетрациклины, хлорамфеникол, полусинтетические пенициллины и цефалоспорины 1II-IV
поколений.
При постановке опытов по изучению антибиотикочувствительности соблюдение ряда
условий является определенной гарантией их достоверности. К ним относятся:
- Выбор адекватных питательных сред, которые должны отвечать требованиям
стандартности и воспроизводимости результатов. В их составе не должны содержаться,
вещества подавляющие действие антибиотиков и синтетических препаратов.
В наибольшей степени соответствует указанным требованиям при определении
антибиотикочувствительности среда Мюл-лер-Хинтона. Возможным также является
использование бульона или 1,5-2% агара Хоттингера, содержащего 110-130 мг% аминного
азота с необходимыми добавками при определении чувствительности b-гемолитических
стрептококков группы А, В. При определении чувствительности гемофильной палочки,
возбудителей опасных инфекционных заболеваний применяют специальные среды.
Подробные рекомендации по этому разделу приведены в соответствующих руководствах
[1,2,3].
- Первоначальные концентрации оцениваемых препаратов устанавливаются с учетом
токсичности, установленной в опытах по изучению острой токсичности, ориентировочной
химической структуры нового соединения. Первая пробирка ряда при проведении
исследований методом серийных разведении в исходной питательной среде обычно содержит
испытуемый раствор в концентрации 100-200 мг/л. В ее присутствии обычно подавляется
рост
большинства
музейных
антибиотикочувствительных
штаммов,
а
также
множественноустойчивых эталонных и клинических штаммов. Эти концентрации
превышают в 8-10 и более раз максимальный уровень концентраций антибиотиков в крови
при их введении в максимально переносимых дозах.
Основной раствор вещества, из которого готовят последующее разведение, должен
содержать 1 мг (1000 мкг) в 1 мл. Из него готовят рабочий раствор - 100-200 мг/л, который
последовательно разводят двукратно в жидкой или плотной питательной средах в ряду из 8-
10 пробирок. Последняя пробирка служит контролем роста культуры.
- Величина посевной дозы. Обычно используют взвесь суточной бульонной или
агаровой культуры тест-штаммов из расчета 10\10\10 7 ,10' КОЕ/мл в объеме 0,2 мл, которую в
зависимости от задачи опыта добавляют в каждую пробирку с разведениями испытуемого
препарата. Пробирки инкубируют при температуре 37°С в течение 18-24 ч. Результаты
оценивают визуально, определяя наличие или отсутствие роста в среде, содержащей
различные концентрации испытуемого соединения. Последняя пробирка ряда с задержкой
роста (прозрачный бульон) соответствует минимальной подавляющей (бактериостатической
концентрации) препарата в отношении данного штамма. Бактерицидную концентрацию
определяют путем высева из 2-3 последних пробирок ряда с отсутствием видимых признаков
роста на агар или бульон. После оптимального для каждого микробного вида срока
инкубации посевов отмечают наименьшую концентрацию вещества в пробирке, высев из
которой не дал роста. Эту концентрацию принимают за минимальную бактерицидную [4].
2.2.4. Сравнительную степень антибактериальной активности препаратов оценивают
величиной минимальной подавляющей (МПК) или бактерицидной концентрации (МБК),
определяемых не менее, чем при 2-х значениях посевной дозы: минимальной (10 4 -10 5
КОЕ/мл) и максимальной (10 6 -10* КОЕ/мл) в зависимости от вида возбудителя. По разнице