Упрощенная HTML-версия
На скрининговом этапе исследования критерием отбора перспективных
гепатопротекторов служит их более высокая терапевтическая эффективность, чем у
эталонных веществ. Необходимо установить острую токсичность изучаемых препаратов:
перспективны лишь вещества, относящиеся к III-IVклассам.
2. РАСШИРЕННОЕ ИЗУЧЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ГЕПАТОЗАЩИТНОЙ
АКТИВНОСТИ И ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ ОТОБРАННЫХ НА
ПЕРВОМ ЭТАПЕ СОЕДИНЕНИЙ
А. Модели острой патологии печени
Показателем терапевтической эффективности потенциальных гепатопротекторов
является уменьшение морфогистохими-ческих, биохимических и функциональных
нарушений при экспериментальных поражениях печени. Для моделирования острого
гепатита на крысах применяют вещества с различным механизмом патогенного действия:
1. Гепатотоксины,
преобразуемые
зависимой
от
цитохрома
Р-450
монооксигеназной системой в свободные радикалы и электрофильные интермедиаты,
ковалентно связывающие биомакромолекулы центролобулярных гепатоцитов (СС1 4
фторотан, бромбензол, парацетамол, тетрациклин).
2. Аллиловый
спирт, окисляемый цитозольной и митохондриальной
алкогольдегидрогеназами в электрофильный метаболит акролеин, повреждающий
перипортальные гепатоциты вследствие дефицита в них восстановленного глутатиона.
3. Гепатотоксины, первично нарушающие обмен РНК и белка в гепатоцитах (D-
галактозамин)*.
Бромбензол вводят внутрибрюшинно в дозах 0,25-0,4 мг/ кг однократно; парацетамол
(ацетаминофен) - в желудок в дозах 500-1000 мг/кг 1-2 дня: тетрациклин - в желудок в дозе
500 мг/кг на протяжении 5 дней; аллиловый спирт - в желудок в дозах 0,05-0,1 мл/кг или
внутрибрюшинно в дозе 0,05 мл/кг 1 -2 дня. Ингаляцию фторотана (галотана) проводят в
концентрации 0,5-1 об% в течение 2-4 ч (концентрацию кислорода в вдыхаемой смеси
снижают до 10-14 об%). Применение СС1 4 и D-галактозамина для моделирования гепатита
описано в разделе 1.
Жировой гепатоз вызывают у крыс с помощью интоксикации гидразином (в желудок
180-200 мг/кг, 1-2 дня) или этанолом (в желудок 7-10 мл/кг 40% раствора, 7 дней).
Повреждение печени для оценки гепатозащитного эффекта получают также
временным (20-30 мин) пережатием печеночной артерии и воротной вены. Возникающая при
этом тотальная ишемия моделирует ситуации, наблюдаемые в условиях трансплантации
печени, сердечно-сосудистой недостаточности и инфаркта миокарда. Влияние новых
гепатопротекторов на процессы регенерации паренхимы печени оценивают на модели
резекции 1/3-2/3 органа.
Потенциальные гепатопротекторы вводят профилактически за 1-2 ч до поступления в
организм гепатотоксинов или ишемии, одновременно с гепатотоксинами или с лечебной
целью на фоне сформированной патологии печени.
О влиянии препаратов на состояние пораженной парехимы печени судят по
следующим тестам:
Гистологическое строение печени.
На обзорных препаратах печени, окрашенных
гематоксилин-эозином или галлоцианин-пикрофуксином, изучают гистологическую картину,
подсчитывают количество некротизированных гепатоцитов (имеющих ядра в состоянии