Упрощенная HTML-версия
6.10.4.1. Критерии адекватности постановки опыта
1. Эффективность клонирования ТС-клеток в смешанной культуре в контроле с
растворителем не должна превышать 30%от эффективности клонирования ТС-клеток в
отсутствие TG s -icneTOK в контроле с растворителем.
2. Выживаемость ТС-клеток в смешанной культуре при обработке промотором
ТФА (положительный контроль) должнабыть более чем в 2 раза выше, чем в контроле с
растворителем.
3. Цитотоксическое действие хотя бы 1-2 изучаемых концентраций тестируемого
соединения не должно быть выше 30%.
6.10.4.2. Оценка результатов
Данные представляют в виде количества колоний на чашку во всех группах опыта и
контроля. Указывают количество колоний для каждой чашки, среднее количество на чашку и
стандартное отклонентие.
Эксперимент повторяют не менее 5 раз.
Определяют цитотоксическое действие всех изученых концентраций тестируемого
соединения. Вычисляют в % относительную эффективность клонирования TG R -клеток по
отношению к контролю с растворителем (ЭК). Концентрации тестируемого соединения,
вызвавшие снижение ЭК более, чем на 30% по сравнению с контролем, при оценке влияния
соединения на метаболическую кооперацию не рассматривают.
Абсолютное количество колоний TG R -ioieTOK, выявленное в чашках каждой группы,
умножают на соответствующую данной группе ЭК.
Значимость различий выживаемости ТО к -клеток в смешанной культуре, обработанной
тестируемым соединением, оценивают при помощи критерия Стьюдента.
Критериями положительного ответа являются:
– наличие достоверного увеличения относительной эффективности клонирования
ТО к -клеток в культурах, обработанныхтестируемым соединением по сравнению с контролем;
– высокая воспроизводимость результата (не менее чем в трех опытах из трех);
– существование зависимости «доза-эффект».
6.10.5. Отчетность
Протокол представления результатов оценки способности соединения к
угнетению метаболической кооперации в смешанной культуре клеток
Название эксперимента: Культура клеток: Вещество:
название
формула, физико-химические свойства
откуда получено
растворитель
позитивный контроль
Анализ данных литературы:
Схема эксперимента:
дата проведения
дозы (концентрации) группы