Упрощенная HTML-версия
гормональных препаратов (например, контрацептивов) тестирование канцерогенности
рекомендуется проводить также на крупных животных -собаках или обезьянах. При этом
период наблюдения увеличивается до 7-10 лет. (В этом случае в Минздрав России каждые 2
года представляются этапные промежуточные отчеты о состоянии подопытных животных).
Условия содержания и рационы питания животных должны находиться в соответствии
с общепринятыми в нашей стране рекомендациями.
Контрольные и подопытные животные должны быть одного возраста, получены
одновременно из одного питомника. Наличие контрольных групп является обязательным во
всех случаях, в том числе при работе на животных с хорошо известной онкологической
характеристикой, поскольку частота и спектр спонтанных опухолей могут с течением
времени меняться даже у высоко инбредных линий. В каждую подопытную группу следует
брать не менее 50 животных каждого пола. Таким образом, на испытание одного вещества
при одном пути введения и двух дозах требуется не менее 600 животных (200 мышей и 200
крыс в подопытных группах и 200 животных в контроле).
4. Исследуемые дозы
Для изучения канцерогенности ЛС, как правило, используются две дозы.
При выборе дозы ЛС исходят из предпосылки, что наиболее выраженный
канцерогенный эффект проявится при использовании максимально переносимой дозы
(МПД). В соответствии с международными требованиями, МПД определяют как
максимальную дозу, не приводящую к гибели животного от токсического действия и
вызывающую в субхроническом эксперименте торможение нарастания массы тела не более,
чем на 10% по сравнению с контролем. Наряду с МПД необходимо использовать
терапевтическую дозу для человека. Для нетоксичных соединений целесообразно изучить
терапевтическую и 10-кратную терапевтическую дозы. Решение о выборе дозы специально
обосновывается в протоколе исследования. Определение МПД проводится па каждом виде
животных обоего пола, при каждом методе введения.
Определение МПД включает два этапа. На первом этапе проводят исследования
токсичности вещества в остром опыте с целью определения ЛД 50 и ЛД 16 по методу
Лнтчфилда и Уилкоксона. За динамикой гибели животных ведут наблюдение в течение 14
дней.
На втором этапе определяется МПД в субхроническом опыте. Этот опыт желательно
проводить на 6-8-ноделъных животных обоего пола (при каждом методе введения и па
каждом виде животных). В экспериментальную группу входят минимум 3 самца и 3 самки
одинаковой массы, о групп подопытных животных получают тестируемый препарат в разных
дозах, 6-я группа - контрольная. Максимальная доза находится на уровне ЛД 16 ,
определенной в остром опыте. Следующие 4 группы получают более низкие дозы, каждая из
которых в 1.5 раза ниже предыдущей. В этом режиме вещество вводят подопытным
животным в течение 6-8 недоль и затем 2 недели наблюдают за их состоянием. Контрольным
животным вводят растворитель. Критериями токсического действия вещества в
субхроническом опыте являются гибель животных или торможение нарастания массы тела.
Поэтому при проведении опыта следует строго следить за стандартностью корма животных,
который должен быть такой же, как в планируемом хроническом исследовании на
канцерогенность. Взвешивание животных проводят 1 раз в неделю.
Увеличивать МПД в ходе хронического опыта нельзя.