Упрощенная HTML-версия
3.6. Конъюнктивальная проба
Сенсибилизацию животных осуществляют в соответствии со способом введения
тестируемого препарата в клинике. Для постановки пробы 1 каплю водного раствора
аллергена вводят глазной пипеткой с вытянутым тонким концом под верхнее веко
подопытным и контрольным морским свинкам, во второй глаз (контрольный) вводят 1 каплю
воды. Закапывание удобно производить при положении животного лежа головой вниз [12].
Реакции учитывают через 15 мин (быстрая реакция) и через 24-48 часов
(гиперчувствительность замедленного типа) и оценивают по следующей шкале (в баллах):
1– легкое покраснение слезного протока;
2– покраснение слезного протока и склеры в направлении к роговице;
3– покраснение всей конъюнктивы и склеры. Реакция сопровождается зудом и при
расчесывании лапками возможно развитие гнойного офтальмита. Подбор концентрации
аллергена
осуществляется
путем
закапывания
различных
концентраций
в
глазнесенсибилизированного животного.
3.7. Метод оценки чувствительности гладких мышц трахеобронхиальной
цепочки морских свинок
при ингаляционном пути введения тест-препарата
Сразу же после забоя морских свинок готовят изолированную трахеобронхиальную
цепочку из 16-20 отдельных колец трахеи, связанных по стороне хряща тонкой шелковой
ниткой таким образом, чтобы участки гладких мышц, соединяющих хрящевые концы
отдельных колец, находились на одной линии и составляли продольную полоску длиной 3-4
см. Приготовленную цепочку помещают в отдельный сосуд-»баню», который заполняют 10
мл питательного раствора Кребс-Гензелейта с температурой 35-37 о С [13].
Состав раствора в г/л Н 2 О:
NaCI - 6,87
KCI - 0,42
СаС1 2 - 0,28
NaHPO 4 -0,15
MgSO 4 x7HO-0,29
NaHCO 3 -2,l
глюкоза -1,0
Через питательный раствор в течении всего опыта пропускают газовую смесь,
состоящую из 95% О 2 и 5% СО 2 . Исследуемые вещества вносят в баню в объеме 0,1-0,2 мл,
затем цепочку многократно отмывают свежими порциями питательного раствора. Повторные
дозы исследуемых веществ вносят через 15-20 мин. Определяют концентрацию препаратов,
которые вызывают пороговое сокращение цепочки. Чувствительность последней к каждому
веществу выражают в микрограммах на миллиметр.
3.8. Непрямая реакция дегрануляции тучных клеток (РДТК)
Постановку РДТК осуществляют следующим образом [14, 15]. Для получения тучных
клеток крыс животных забивают кровопусканием, вводят внутрибрюшинно 5-8 мл