Упрощенная HTML-версия
введении образуется так называемая лимонная корочка. Если на месте введения через
некоторое время появляется кровь, то необходимо ввести препарат в другое место. Для
контроля реактивности кожи обязательно вводить тому же животному на другом
выстриженном участке 0,05 мл растворителя (стерильный физиологический раствор). Для
удобства прочтения реакции, места введения можно обводить разноцветными фломастерами.
Разрешающие инъекции препарата и синего Эванса вводят также контрольным животным,
которым в дни сенсибилизации опытных групп вводили только растворитель. У таких
животных в месте внутри-кожного введения препарата диаметр окрашенного пятна не
должен превышать 2-3 мм. Возможно воспроизведение активной кожной анафилаксии и на
мышах.
3.1.3. Пассивная кожная анафилаксия
В случае положительной реакции активной кожной анафилаксии (АКА) проводят
постановку реакции пассивной кожной анафилаксии (ПКА), во-первых, для идентификации
гомоцитотропных антител, во-вторых, для определения их титра [6,7]. Сенсибилизация
подопытных животных осуществляется по той же схеме, что и для общей анафилактической
реакции.: сыворотку крови подопытного и контрольного животного (в нескольких
разведениях) вводят внутрикожно интактной морской свинке-альбиносу. Через 24 часа
внутривенно вводят смесь испытуемого препарата в дозе, установленной для реакции АКА, и
0,5 мл 1% раствора синего Эванса. Через 15 мин учитывают реакцию. Титром антител
считают наибольшее разведение, при котором возможно осуществление пассивного
переноса. Титры AT выражают в Log, разведения сыворотки. Большим преимуществом этого
метода является высокая специфичность и возможность получения четкой количественной
характеристики процесса, что осуществимо при использовании красителя.
3.2. Реакция гиперчувствительности «замедленного» типа
на мышах
Известно, что интенсивность реакций гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ)
к химическим соединениям и их длительность зависят от сроков формирования и
сочетанного действия различных субпопуляций Т-супрессоров, подавляющих ГЗТ. Поэтому
при индукции ГЗТ путем введения мышам химических аллергенов в полном адъюванте
Фрейнда (ПАФ), при котором не происходит формирования Т-супрессоров, возможно
усиление кожных аллергических реакций и выявление аллергенных свойств даже слабых
химических аллергенов.на нелинейных мышах, массой 18-20 г. Мышей сенсибилизируют
однократно путем внутрикожного введения в основание хвоста 60 мкл эмульсии препарата в
ПАФ - дозы, эквивалентной 10 мМ раствору в ПАФ в соотношении 1:1. Для приготовления
такой эмульсии используют раствор Хенкса с рН 7,5.
Для выявления сенсибилизации через 5 суток мышам в подушечку задней лапы вводят
40 мкл 10 мМ раствора тест-препарата в растворе Хенкса. Через 6-22-24 часа после
тестирования измеряют величину отека с помощью инженерного микрометра МК-0-25.
Разница в толщине обеих лапок характеризует величину отека, по которой можно судить об
интенсивности реакции ГЗТ [8].
Контрольных животных сенсибилизируют эмульсией ПАФ с раствором Хенкса по той
же схеме, что в опыте.
В каждой группе должно быть не менее 10 животных. В том случае, если тест-
препарат становится аллергеном в процессе метаболизма, например, пенициллин,