Упрощенная HTML-версия
15
ратов осуществляли на фотомикроскопе NIKON Eclipse 400.
Гистологические исследования проводились на базе патомор-
фологического отдела Омского диагностического центра. Для повы-
шения достоверности результатов нами был применен blind-method
(метод «ослепления» патолога), т.е. патолог, оценивающий изменения
в кожном биоптате, взятом из края псориатической папулы, не был
информирован о стадии и форме заболевания, а также характере про-
веденной терапии. Доставляемые в лабораторию флаконы с биопсий-
ным материалом были маркированы с указанием исследовательского
номера, временем взятия биоптата. В дальнейшем мною совместно с
проф. А.В. Кононовым биопсийный материал пересматривался с по-
следующим проведением клинико-морфологических сопоставлений.
2. Иммуногистохимическое исследование
выполняли на се-
рийных парафиновых срезах с использованием следующей панели ан-
тител (табл. 1.5). Для выявления маркерных белков пролиферации,
апоптоза и дифференциальных антигенов мононуклеарного воспали-
тельного инфильтрата срезы толщиной 5 мм тщательно депарафини-
ровали в 2-х порциях ксилола по 5 минут с последующим обезвожива-
нием в батарее спиртов нисходящей концентрации -95
0
, 95
0
, 80
0
– по 3
минуты в каждом.
Таблица 1.5
Панель антител к маркерным белкам пролиферации,
апоптоза и дифференциальных антигенов мононуклеарно-
го воспалительного инфильтрата
Ki67
клон MIB-1 (“DAKO”, Да-
ния)
Ядерный маркер пролифера-
ции
Bcl-2 клон 124 (“DAKO”, Дания)
Антиапоптотический белок
митохондрий
P53
клон DO-7 (“DAKO”, Дания) Ядерный маркер апоптоза
CD4
клон RTU – CD4 – 1F6 (“No-
vocastra”, Великобритания)
Мембранный маркер Т-
лимфоцитов-хелперов
CD8
клон RTU – CD8 – 295 (“No-
vocastra”, Великобритания)
Мембранный маркер Т-
лимфоцитов-
киллеров/супрессоров
HLA-
DR
клон LN3 (“Novocastra”, Ве-
ликобритания)
Мембранный маркер антиген-
презентирующих клеток
Так как наличие остаточного парафина в срезах приводило к