52
После синтеза диагностического реагента на основе белка
ESAT-CFP в лаборатории биотехнологии НИИ молекулярной ме-
дицины ММА им. И.М. Сеченова было произведено его тестиро-
вание. Для определения ГЗТ к M. tuberculosis в качестве модели
использовали морских свинок, которых внутрибрюшинно сенси-
билизировали живыми M. bovis BCG, M. аvium и M. tuberculosis
H37Ra в количестве 10
7
микробных клеток в 0,2 мл фосфатного
буфера, рН 7,2. На 6-й неделе после сенсибилизации в выбритый
участок кожи экспериментальным животным вводили внутри-
кожно по 2 мкг антигенов в 0,1 мл физиологического раствора и
по 10 ЕД туберкулинов, полученных из штаммов M. bovis BCG,
M. аvium и M. tuberculosis. Через 24 часа оценивали диаметр эри-
темы, образовавшейся в месте инъекции (табл. 5).
Таблица 5
Оценка гиперчувствительности замедленного типа
у морских свинок с помощью теста кожного
с рекомбинантным белком ESAT-CFP
Антигены
Диаметр кожной реакции (в мм) у морских свинок,
иммунизированных:
M. bovis BCG
M. аvium
M. tuberculosis
PPD-t (M. tuberculosis)
8,9±1,3
8,0±1,4
12,9±1,2
PPD-b (M. bovis BCG)
12,1±1,3
9,5±1,5
9,8±1,5
PPD-a (M. аvium)
8,8±1,5
12,6±1,4
9,2±1,3
ESAT-CFP
0,5±1,0
0,6±1,0
11,2±1,3
Как следует из приведенных в таблице 1 результатов, диагно-
стический реагент для кожной пробы на основе рекомбинантного
белка ESAT-CFP позволяет достоверно дифференцировать ГЗТ,
обусловленную инфицированием M. tuberculosis, от реакций, свя-
занных с вакцинальным иммунитетом (БЦЖ) и инфицированием
другими видами микобактерий.
Преимущество квантиферонового теста, широко используе-
мого для диагностики туберкулеза за рубежом, по сравнению с
кожной пробой мотивируется тем, что пациент приходит к врачу
один раз – сдать кровь из вены, в то время как для кожной пробы
пациенту нужно приходить дважды – для постановки пробы и
для регистрации результата. Вместе с тем стоимость квантиферо-