Упрощенная HTML-версия
50
Успехи современной биотехнологии, в частности расшиф-
ровка и сравнительный анализ геномов разных видов микобакте-
рий, позволили обнаружить у M. tuberculosis область RD1 (region
of difference 1), специфическую только для этого микроорганиз-
ма. Было установлено, что в этой области M. tuberculosis кодиру-
ет, в частности синтез двух секреторных белков ESAT-6 (early se-
creted antigenic target) и CFP-10 (culture filtrate protein), которые
отсутствуют у M. bovis БЦЖ и большинства непатогенных мико-
бактерий.
Возможность использования синтетических белков ESAT-6 и
SFP-10 в качестве реагентов для детекции туберкулеза была де-
тально изучена в лабораториях США, Германии, Дании и других
стран (S.M. Arend et al., 2001; I. Brock et al., 2001; P. Brodin et al.,
2005; D.G. Dillon et al., 2000; T.M. Doherty et al., 2002; Y. Kobashi
et al., 2007; M.E. Munk et al., 2001; P. Ravn et al., 2005; S.T. Reece
et al., 2005; W.R. Waters et al., 2004).
Исследования показали, что использование синтетического
пептида ESAT-6 позволяет уверенно дифференцировать ГЗТ по-
ствакцинального происхождения и ГЗТ, проявляющуюся при ин-
фицировании M. tuberculosis (Y. Kobashi et al., 2007; T. Ozekinci et
al., 2007). ГЗТ в данном случае измеряется путем инкубации
лимфоидных клеток в присутствии пептидных детерминтант
ESAT-6. При положительной реакции наблюдается активный
синтез ИФН-γ. На основе этого была разработана и успешно
применяется диагностическая система – квантифероновый тест
(QuantiFERON®-TB test) (G.N. Mazurek, 2003, 2005).
Однако проведение и постановка квантиферонового теста
имеет ряд недостатков: во-первых, она требует быстрого прове-
дения анализа, в силу того, что лимфоциты со временем теряют
свою активность; во-вторых, необходима дорогостоящая лабора-
торная техника для определения уровня ИФН-γ методом имму-
ноферментного анализа; в-третьих, необходимо инвазивное вме-
шательство – забор крови из вены у пациента.
В лаборатории биотехнологии НИИ молекулярной медицины
ММА им. И.М. Сеченова также предпринимались попытки иден-
тификации антигенных детерминантов, закодированных у Myco-
bacterium tuberculosis в области RD1, для детекции туберкулеза.
Схема постановки таких экспериментов предполагала, что иско-