59
бластные клетки под действием специфического митогена – ту-
беркулина. Реакция состоит из 3-х этапов:
1)
выделение лимфоцитов (или лейкоцитарной массы);
2)
культивирование лимфоцитов (лейкоцитов) с ППД-Л;
3)
оценка результатов.
Данную реакцию можно оценивать морфологическим мето-
дом (подсчет визуальный в окрашенных мазках – может давать
субъективные ошибки), а также по степени активности включе-
ния ³Н-тимидина (используя для этого автоматический сцинтил-
ляционный счетчик).
При культивировании лимфоцитов в подопытные флаконы в
культуральную жидкость вносят туберкулин (туберкулин-сухой
лиофилизированный, Ленинградский ин-т вакцин и сывороток).
Оптимальная конечная концентрация его составляет 60 мкг/мл.
Флаконы, содержащие клетки и необходимые ингредиенты для
их культивирования, помещают в термостат при 37°С и инкуби-
руют в течение 4-х суток (96 часов).
В контрольных культурах (без ППД-Л) или в культурах кле-
ток с ППД-Л от здоровых туберкулин-отрицательных лиц доля
бластных клеток обычно не превышает 1%. Положительным ре-
зультат считается, когда число бластов достоверно превышает
контрольный уровень (не менее, чем в 2 раза).
Для фазы инфильтративной вспышки заболевания с тенден-
цией к прогрессированию характерна низкая степень бластообра-
зования в культурах (0-5%). В этой фазе заболевания, но при
начальном обратном развитии туберкулезных поражений вели-
чина бластообразования в культурах, как правило, значительно
возрастает (10-20%) и зависит от темпов положительной динами-
ки. В фазе рассасывания и уплотнения процент бластоподобных
клеток в культурах остается высоким, постепенно снижаясь с по-
терей активности процесса (5-10%). Усиление РБТЛ совпадает с
повышением защитных сил организма.
Степень пролиферативной реакции зависит от технических
условий постановки реакции: качества питательной среды, при-
готовленной культуральной жидкости, т.е. входящих в ее состав
ингредиентов, и, особенно, присутствия или отсутствия аутоло-
гической сыворотки либо плазмы, а также от вида применяемого
туберкулина и его коцентрации.