Упрощенная HTML-версия
58
3)
синтеза (достройки) цепи фрагмента ДНК с помощью термо-
стабильной ДНК-полимеразы. Многократное удвоение цепей
ДНК (30-40 циклов) позволяет в течение нескольких часов
умножить (амплифицировать) специфический участок ДНК в
геометрической прогрессии, а затем идентифицировать его
(при электрофорезе в агарозном геле в присутствии красите-
ля этидия бромида синтезированный фрагмент ДНК выявля-
ется в виде светящейся под действием ультрафиолета поло-
сы).
Высокая чувствительность (теоретически возможно опреде-
лять единичные M.tuberculosis в образце) и быстрота проведения
анализа (1-2 дня) чрезвычайно ценны для клинической практики.
Проблема специфичности ПЦР в диагностике туберкулеза обу-
словлена высоким риском ложноположительных результатов, по-
скольку продукты амплификации (фрагменты ДНК) легко могут
попасть в исследуемые образцы и служить матрицей для новых
реакций. По данным И.Б.Викторова и А.Л.Ханина (2003) чув-
ствительность ПЦР 14,3%, специфичность 87,5%.
По результатам исследования Е.А.Марениной ДНК МБТ ме-
тодом ПЦР в крови определяли у 59,3% детей с усиливающейся
туберкулиновой чувствительностью и у 60,9% детей при гипере-
ргических реакциях на пробу Манту с 2 ТЕ. В группах риска по
результатам туберкулинодиагностики положительные результаты
ПЦР на ДНК МБТ были выявлены у 60,3% детей. У детей из
группы с установленным диагнозом локального туберкулеза по-
ложительные результаты на наличие ДНК МБТ в крови установ-
лены в 46,8%.
Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с ту-
беркулином (ППД-Л).
Данная реакция служит для оценки со-
стояния специфического клеточного иммунитета (появление сен-
сибилизированных лимфоцитов является в отличие от образова-
ния антител очень ранним специфическим этапом иммунного от-
вета) и используется в клинике (особенно в комплексе с рядом
других иммунологических тестов) для дифференциальной диа-
гностики туберкулеза, оценки активности его течения и выявле-
ния минимальной активности туберкулезных поражений. Меха-
низм этой реакции состоит в трансформации лимфоцитов в