Упрощенная HTML-версия
142
Принцип метода.
Метод основан на способности пептидных
групп белков и полипептидов образовывать в щелочной среде с
ионами Сu
2+
комплексное соединение фиолетового цвета с крас-
ным или синим оттенком в зависимости от числа пептидных свя-
зей в белке.
Биуретовая реакция положительна с белками и пептидами,
имеющими не менее двух пептидных связей
(– С – NH –)
| |
О
Ход определения.
В пробирки к 5 каплям раствора окситоци-
на и инсулина прибавляют 6 капель раствора едкого натра и 2
капли раствора сернокислой меди и перемешивают. Содержимое
пробирки приобретает фиолетовый цвет.
Нингидриновая реакция
Принцип метода.
Метод основан на взаимодействии нин-
гидрина с альфа-аминогруппой аминокислот, пептидов, белков с
образованием окрашенного комплекса синего или сине-
фиолетового цвета.
При нагревании в присутствии нингидрина происходит окис-
лительное дезаминирование альфа-аминогрупп аминокислот и
пептидов, а молекула нингидрина при этом восстанавливается
Восстановленный нингидрин реагирует с аммиаком и другой
молекулой окисленного нингидрина, в результате образуется
окрашенное соединение сине-фиолетового цвета.
Ход определения.
В пробирки к 5 каплям раствора окситоци-
на и инсулина приливают 5 капель водного раствора нингидрина,
ставят пробирку на кипящую водяную баню до появления сине-
фиолетового окрашивания.
Реакция Фоля
Принцип метода.
Метод основан на способности белков, в
состав которых входят аминокислоты, содержащие слабо связан-
ную серу (цистин, цистеин), в щелочной среде при нагревании
образовывать сульфид натрия (Na
2
S), который с плюмбитом
натрия (Na
2
PbO
2
) дает черный или бурый осадок сульфида свин-
ца.