Упрощенная HTML-версия
г) иммунологическую характеристику в опытах перекрестного иммунитета;
д) серологический анализ антигенной структуры.
В последние годы выявлен ряд новых риккетсий, не культивируемых на традиционных
риккетсиологических моделях (лабораторные животные, куриные эмбрионы). Для их
культивирования использована клещевая экспериментальная модель (воспроизведение
естественного цикла развития иксодид) и длительно культивируемые линии клеток
млекопитающих (Vero, Hep-2) и иксодовых клещей.
Для группоспецифической идентификации риккетсий группы КПЛ можно использовать
РСК с сыворотками крови биопробных морских свинок и цельно-растворимыми антигенами
оригинальных штаммов риккетсий и музейных штаммов известных видов. Дифференциация
риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ) ранее базировалась
преимущественно на учете их токсических свойств, а также использовании корпускулярных
антигенов и иммунных мышиных сывороток для идентификации риккетсий. Можно
использовать метод флюоресцирующих антител с мазками-отпечатками желточных мешков
куриных эмбрионов, ИФА и РНГА с иммуноглобулиновым диагностикумом для выявления
риккетсий группы КПЛ и сыпного тифа производства Пермского филиала НПО «Микроген».
Дальнейшая идентификация проводится в перекрестной РСК с сыворотками мышей СВА
и набором антигенов риккетсий, в реакции непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ) с
моноклональными антителами к риккетсиям, а также с помощью генетических методов
(рестрикционный анализ ДНК, ДНК-зондирование, полимеразная цепная реакция с
использованием праймеров области гена цитратсинтазы и белкового антигена 190 кДа с
последующим определением нуклеотидных последовательностей амплифицированных
фрагментов ДНК и др.).
Серологическая диагностика
У риккетсий и ориенций выявлено наличие перекрестно реагирующих эпитопов с
протеями. Реакция агглютинации Вейля-Феликса с протеями была первым тестом,
использованным для серодиагностики риккетсиозов. Антигены из клеточных стенок
Proteus
vulgaris
ОХ-2 реагируют в реакции агглютинации с сыворотками больных риккетсиозами
группы КПЛ, за исключением пятнистой лихорадки Скалистых гор, Антигены
Proteus
vulgaris
ОХ-19 взаимодействуют с сыворотками крови больных риккетсиозами группы СТ и
пятнистой лихорадки Скалистых гор. Сыворотки больных болезнью Брилля-Цинссера и
осповидного (вызываемого
R.akari
) риккетсиоза обычно не вступают в реакцию
агглютинации Вейля-Феликса. Ориенции не имеют антигенных связей с риккетсиями групп
СТ и КПЛ, однако имеют общие антигенные детерминанты с
Proteus mirabilis
OXK,
выявляемые в реакции Вейля-Феликса (РА).
Реакцию Вейля-Феликса с протейными антигенами и варианты реакции агглютинации со
специфическими риккетсиальными антигенами в настоящее время применяют редко в связи с
недостаточной чувствительностью и специфичностью. Существует более чувствительный
метод микроагглютинации с меченными флюорохромом риккетсиями для серодиагностики
риккетсиозов группы СТ производства Пермского филиала НПО «Микроген», однако не
нашедший широкого применения в практике.
В течение многих десятилетий реакция связывания комплемента (РСК) являлась базовым
методом серологической диагностики риккетсиозов. Метод обладает высокой групповой
специфичностью даже при низких (1:10-1:20) разведениях сывороток, однако недостаточно
чувствителен в ранней фазе заболевания. Комлементсвязываюшие антитела при большинстве
риккетсиозов групп СТ и КПЛ выявляют в конце первой – начале второй недели инфекции, в
некоторых случаях – в более поздние сроки. Наличие группоспецифического
полисахаридного комплекса в составе препарата растворимого антигена для РСК приводит к