Упрощенная HTML-версия
При оценке фагоцитоза
к скрининговым тестам относят определение количества
нейтрофилов, изучение их морфологии и образования активных форм кислорода, к
развернутым – определение киллинга микробов, лизосомальных ферментов, цитокинов.
Существующие методы оценки иммунного статуса постоянно совершенствуются,
однако есть ряд общих правил, которых необходимо придерживаться при оценке
иммунограмм:
– комплексный анализ, а не оценка одного показателя;
– анализ в комплексе с клиническими и анамнестическими данными;
– оценка резких сдвигов показателей (не менее 20% от нормы);
– анализ в динамике;
– анализ не только (и не столько) абсолютных данных, а соотношений
показателей (особо – индекс Th/Ts);
– учет возможных индивидуальных особенностей (возраст, сопутствующие
заболевания) и колебаний показателей (физиологических и патологических – прием пищи,
физические нагрузки, время суток, действие стрессоров и т.д.);
– учет региональных норм;
– учет материально-технической базы лаборатории. На вооружении современной
лаборатории – проточные цитометры и другое оборудование, которое позволяет наиболее
точно и подробно определить иммунный статус (лазерная проточная цитофлюориметрия).
Методы исследования лимфоцитов можно разделить на
изучение поверхностных
маркеров и функциональные тесты.
Изучение поверхностных СД антигенов
основывается на:
– методах розеткообразования;
– методах иммунофлюоресценции;
– иммуноферментном анализе.
Для определения
количества Т-клеток
чаще используют метод розеткообразования с
эритроцитами барана. Метод основан на родстве рецептора CD2 с белками мембраны
эритроцитов барана. При смешивании лимфоцитов с эритроцитами барана образуются
фигуры в виде розеток. Количество розеткообразующих клеток (Е – РОК) соответствует
количеству Т-лимфоцитов (CD2+клеток).
Для определения
количества В-клеток
используют EAC-розетки. Лимфоциты
смешивают с эритроцитами быка, обработанными комплементом и антителами к
эритроцитам.
Важнейшее значение имеет вычисление индекса CD4/CD8 (хелперно-супрессорного
отношения). Необходимо учитывать, что нет единого метода для оценки Т-хелперов и Т-
супрессоров.
CD8+ несут Т-супрессоры и Т-киллеры, часть NK-клеток.
CD4+ несут Т-хелперы и Т-индукторы, моноциты, эффекторы – Т-клетки ГЗТ.
Поэтому оценку Ts и Th осуществляют также в теофиллиновом тесте. Т-супрессоры в
присутствии теофиллина теряют способность к Е-розеткообразованию (теофиллин-
чувствительные Т-лимфоциты), Т-хелперы теофиллин-резистентны. Оценивают также
субпопуляции Т-лимфоцитов с рецепторами для Fc фрагмента: IgM (Т мю) и IgG (Т гамма).
Т-гамма это преимущественно хелперы, Т мю-супрессоры.
К функциональным тестам
относят методы оценки пролиферативной активности
лимфоцитов на Т- и В-митогены (РБТЛ – реакция бластной трансформации лимфоцитов),
продукции антител, синтеза мононуклеарами
цитокинов (особо!).