ВестникНОМУС
.
Сборникматериаловнаучной
сессии
-2013
806
флуоресцентным
красителем
TexasRed® SulfonylChloride.
Для
общего
контроля частьиз
серийных
срезовокрашивалипометодуНиссля
.
На
микроскопе
Axioskop 40, CarlZeiss,
оснащенном
ртутной
лампой
HBO
100,
камерой
на
CCD
датчике
– AxioCfmMRc
и
объективом
ECPlan-
Neofluarx40,
апертура
0,9,
делались
цифровые
микрофотографии
размером
изображения
1300
х
1030
пикселов
,
реальным
размером
220
х
174
мкм
(38280
мкм
2
).
Морфометрический
анализ
изображений
проводили
с
помощью
программы
ImageJ 1.46.
На
иммуногистохимических
препаратах
определяли
площадь
(
мкм
2
),
периметр
(
мкм
)
и
количество
флуоресцирующих
гранул
маркера
в
поле
зрения
препарата
,
на
препаратах
,
окрашенных
по
Нисслю
, -
общую
численную
плотность
нейронов
и
относительное
содержание
реактивноизмененных
клеток
.
Проверку
статистических
гипотез
осуществляли
при
помощи
программы
STATISTICA 8.0
с
использованием
непараметрического
U-
критерия Манна
-
Уитни
и
Колмогорова
-
Смирнова
(
для
парного
сравнения
)
и
ANOVA
Краскела
-
Уоллиса
(
для
множественного
сравнения
).
В
каждом
сравниваемом
случае
количество
измерений
и
полей
зрения
клеток
определялось
требованиями
выявления
статистической
значимости
при
p<0,05.
Результатыисследованияи
их обсуждение
В
норме
флуоресцентная
метка
на
NSE,
в
основном
,
равномерно
заполняла
перикарион
нейронов
ЛБКМ
,
реже
встречалась
в
аксонах
и
дендритах
.
При
хронической
ишемии
мозга
NSE
в
цитоплазме
нейронов
всех
слоев
ЛБКМ
распределялась
неравномерно
:
в
одних
клетках
белок
содержался
в
незначительном
количестве
или
вовсе
отсутствовал
,
а
в
других
его
было
существенно
больше
,
чем
в
контроле
.
По
данным
морфометрического
исследования
иммуногистохимических
препаратов
ЛБКМ
,
при
ишемии
происходило
статистически
значимое
изменение
характера
распределения
,
количества
,
размеровиформыфлуоресцирующихметок
NSE.