Упрощенная HTML-версия
хроматографических диаграмм, которые выражают зависимость величин Л/от
системы растворителей (В.П. Георгиевский с сотр.).
Определение чистоты.
При испытании на чистоту лекарственных
препаратов сердечных гликозидов определяют потерю в массе при высушивании,
сульфатную золу и тяжёлые металлы, прозрачность и цветность растворов, но
особое внимание следует обращать на наличие примеси посторонних гликозидов.
В соответствии с требованиями ФС в дигитоксине, гитоксине и строфантине
К примеси других гликозидов устанавливают методом ТСХ на пластинках с
закрепленным слоем силикагеля или с обращённой фазой. Хроматографируют
восходящим методом в системе растворителей различного состава. Проявляют
хлорамином Б или ж-динитробензолом. О наличии примесей судят по
совокупности величины и интенсивности окраски (флуоресценции) пятен в УФ-
свете или значении их R
r
. В дигитоксине устанавливают спектрофотометрическим
методом по оптической плотности при длине волны 352 нм примеси гитоксина (не
более 5%) и сапонинов (по реакции осаждения холестерином). В коргликоне по ФС
устанавливают отсутствие примеси дубильных веществ (по отрицательной цветной
реакции с ионом железа (III)) и сапонинов (по отсутствию стойкой пены после
взбалтывания).
Количественное определение
.
1
.
Применение спектрофотометрии
для количественного определения
сердечных гликозидов оказалось возможным благодаря избирательному
поглощению в УФ-области спектра (215-220 нм), обусловленному наличием в
агликонах α-, β-ненасыщенного лактонного цикла. Например, количественно
определить дигитоксин можно при длине волны 215 и 219 нм.
Используют спектрофотометрию в видимой области спектра (495±1 нм) для
количественного определения коргликона, дигитоксина и строфантина К
2.
Фотоэлектроколориметрическим методом
сердечные гликозиды
определяют в щелочной среде, фотометрируя окрашенные продукты их
взаимодействия с нитропроизводными ароматического ряда. Значения молярных
показателей
поглощения
образующихся
окрашенных
комплексов
(чувствительность реакций) находятся в зависимости от химической структуры
нитропроизводных: с 2,4-динитродифенилсульфоном 24600-24800, с пикриновой
кислотой 14000-18800, с 3,5-динитробензойной кислотой 6000-9700. Наиболее
широко применяют в качестве реактива пикриновую кислоту или пикрат натрия
(реакция Балье)
для определения дигитоксина, дигоксина, строфантина Г и др.
3. Метод ВЭЖХ.
Качественную и количественную оценку сердечных
гликозидов выполняют также с помощью метода ВЭЖХ, отличающегося высокой
чувствительностью и позволяющего определить не только основные, но и
сопутствующие гликозиды, например в 0,05%-ном растворе строфантина К для
инъекций. Этот метод дает результаты, сопоставимые с биологическим контролем.
ФС на дигоксин рекомендует метод ВЭЖХ для установления подлинности по
идентичности времени удерживания основного пика на хроматограммах
растворов испытуемого и стандартного образцов. Количественное содержание
дигоксина
определяют
с
помощью жидкостного хроматографа со
спектрофотометрическим детектором, при длине волны 220 нм. Содержание
дигоксина вычисляют по измеренным площадям пиков испытуемого и
стандартного образцов.