Упрощенная HTML-версия
Изолирование.
5 мл крови или 50 мл мочи подщелачивают 50 %-ным
раствором едкого натра до р Н9-10 и производят экстракцию диэтиловым
эфиром дважды по 20 мл. Эфирные извлечения объединяют, объем
доводят в мерной колбе емкостью 50 мл до метки, делят на аликвоты
соответственно 10,0,10 и 20 мл, помещают в стеклянные стаканчики,
упаривают досуха.
Хроматографическая очистка и обнаружение ам итриптилина
. Остатки в
стеклянных стаканчиках количественно с помощью хлороформа переносят
на стартовую линию пластинки “Cилуфол”, нанося полосами (длина 1-2
см).
В качестве метчика на пластинку наносят 5-10 капель стандартных
хлороформных растворов амитриптилина - основания и нортриптилина-
основания (0,5 мг/мл) и пластинку хроматографируют в системе бензол-
ацетон (80:20) до продвижения фронта растворителей на 10 см. После
высушивания пластинку хроматографируют в системе бензол-диоксан-
аммиак (60:35:5) до продвижения фронта растворителей на 10 см.
Хроматограмму высушивают на воздухе и в зонах метчиков и первой
полосы
(аликвота
соотв.10
мл),
детектируют
(капельно)
концентрированной кислотой серной. При наличии амитриптилина
наблюдается пятно ярко-оранжевого цвета на уровне метчика с R
f
=0,74-0,78,
в случае нортриптилина проявляется пятно оранжевого или желтого (в
зависимости от концентрации) цвета с R
f
=0,38-0,46. Открываемый
минимум – 0,2 мкг амитриптилина -основания и нортриптилина -
основания в пробе.
При отсутствии на хроматограмме пятна с R
f
=0,74-0,78 дают
заключение о необнаружении амитриптилина.
При наличии на хроматограмме пятен с R
f
=0,74-0,78 и R
f
=0,38-0,46,
параллельных метчикам амитриптилина и норамитриптилина, производят
дальнейшее исследование извлечения.