Упрощенная HTML-версия
Во II варианте - по разности абсорбции в щелочных рН 13 и рН 10 растворах
при
260нм.
D=DpH
13
-DpH
10
|
Использование принципа дифференциальной спектрофотомерии возможно,
когда поглощение примесей при выбранной длине волны не зависит от рН среды.
Тогда при вычитании оптических плотностей происходит уничтожение абсорбции
примесей, что дает возможность получать истинные результаты количественного
определения.
Расчет концентрации ведут по уравнению закона Бугера-Ламберта-Бера:
D = Е
1%
* L *С , откуда С = D /E
1%
* L,
где
С
- концентрация вещества в %;
D
- дифференциальная оптическая плотность (абсорбция);
Е
1%
- удельный показатель поглощения (численно равен поглощению 1%
раствора при толщине слоя 1 см). Рассчитывается заранее для каждого барбитурата по
растворам с известной концентрацией.
L
- толщина светопоглощающего слоя (1 см)
С точки зрения чувствительности определения наиболее выгодным
оказывается 1 вариант, т.к. он дает большую
D
. Однако, в коротковолновой
области при =240 нм сильнее проявляется мешающее влияние примесей, поэтому
чаще этот вариант используют в сочетании с предварительной хроматографической
очисткой.
Во 2 варианте
D
несколько меньше, в связи с чем ниже и чувствительность
определения, но одновременно снижается влияние примесей в более
длинноволновой области при 260 нм. Поэтому увеличивается надежность
определения. Этим вариантом можно пользоваться даже без предварительной
хроматографической очистки, например, при работе с биологическими жидкостями
(кровь, моча), не подвергшимися гнилостному разложению.
Определение концентрации барбитуратов в биологических жидкостях
позволяет: