Упрощенная HTML-версия
(ацетонитрилом, ацетоном, хлороформом, смесью спирта и хлороформа) с
последующей очисткой выделенных веществ.
2 этап. Очистка извлеченных барбитуратов от балластных веществ.
Как правило, барбитураты, выделенные из биологического материала,
содержат примеси посторонних веществ, которые извлекаются совместно с
барбитуратами и являются нормальными компонентами организма (жиры, белки,
пигменты, дубильные, смолообразные вещества и др.). Соэкстрактивные
(балластные) вещества мешают дальнейшей идентификации и определению
барбитурата.
Выбор метода очистки зависит, в основном, от количества изолированного
вещества и, до некоторой степени, от его химического строения. При больших
количествах барбитуратов чаще используют экстракционный метод очистки и
микросублимацию (возгонку).
Экстракционная очистка
основана на способности барбитуратов к имидо-
имидольной таутомерии и на различной растворимости имидной и имидольной
форм в воде и органических растворителях. Используя реэкстракцию барбитурата
раствором гидроксида натрия из органической фазы, тем самым освобождаются от
сопутствующих веществ, нерастворимых в воде (натриевые соли хорошо
растворимы воде и извлекаются ею). Последующее выделение барбитурата из
водной фазы проводят после подкисления водного раствора (рН=2)
экстрагированием органическим растворителем. При этом барбитурат в
молекулярной форме извлекается органическим растворителем, а в водной фазе
остаются балластные вещества, не растворимые в органическом растворителе.
Микросублимация основана на способности барбитуратов возгоняться без
разложения при нагревании.
Возгонка проводится в нагревательной камере прибора Кофлера, либо в
упрощенном виде, с одного предметного стекла на другое, верхнее из которых
охлаждается, а нижнее с исследуемым остатком нагревается.
При малых количествах выделенных веществ чаще используют
хроматографические методы очистки (ионообменную и гель-хроматографию на
колонке, ТСХ, ВЭТСХ, ВЭЖХ).