Упрощенная HTML-версия
5. Диагностика лейкозов
Стандартные методы диагностики лейкозов включают морфологические, цитохими
ческие и иммунологические исследования. Использование этих методов позволяет полу
чить информацию, подтверждающую
природу бластных клеток
и охарактеризовать
линию
и
стадию их дифференцировки
.
При морфологических методах исследования изучаются окрашенные по Романовско-
му-Гимзе (наиболее распространенная окраска) мазки периферической крови, пунктаты
костного мозга, лимфатических узлов и селезенки, а также гистологические препараты,
полученные в результате трепанобиопсии подвздошной кости. Идентифицировать вариант
лейкоза возможно лишь при хорошем знании морфологии клеток гемопоэза. Но даже при
проведении исследования квалифицированными гематологами приблизительно в 1/3 слу
чаев острый миелобластный лейкоз (ОМЛ) неотличим на уровне морфологии от острого
лимфобластного лейкоза (ОЛЛ). Это связано с морфологическими особенностями лейкоз-
ных клеток, отличающих их от здоровых клеток крови:
- для лейкозных клеток характерен анизоцитоз, т.е. бластные клетки могут быть зна
чительно увеличены в размере (в 2-3 раза против нормы) или уменьшены до размера лим
фоцита;
- контуры ядра деформированы, количество хроматина увеличено и распределен он
неравномерно;
- отмечается вакуолизация ядра, его сегментация, многоядерность;
- число нуклеол часто увеличено (до
8
и более), размер их может достигать 1/3-
1 / 2
диаметра ядра;
- отмечается повышенная базофилия цитоплазмы, ее вакуолизация;
- при миелобластном и миеломонобластном лейкозах нередко обнаруживаются выра
женная азурофильная зернистость и тельца Ауэра (они образуются путем слияния азуро-
фильных гранул с матриксом эндоплазматического ретикулума);
- во многих гранулоцитах зернистость отсутствует, другие заполнены ею в 2-3 раза
выше нормы;
- отмечается асинхронизм в развитии ядра и цитоплазмы.
Цитохимические методы исследования позволяют различить не только морфологиче
ски распознаваемые клетки гемопоэза, но и клетки-предшественники. Для этого определя
ется:
- активность миелопероксидазы (МПО);
- содержание липидов (ЛП) в реакции с суданом черным. Миелопероксидаза и липиды
являются высокоспецифичными маркерами миелоидной дифференцировки. В соответ
ствии с ФАБ-критериями, если более 3% бластных клеток дают положительную реакцию
на миелопероксидазу и липиды, то это является основанием для диагностики ОМЛ. При
ОЛЛ реакции на миелопероксидазу и липиды отрицательные;
- содержание гликогена. При ШИК- или PAS-реакции (periodic acid-Schiff, PAS-
reaction) в 40-70% случаев ОЛЛ выявляется гранулярный продукт реакции. Для ОМЛ ха
рактерна диффузная или диффузно-гранулярная реакция. Гранулярная ШИК-реакция не
является специфичной, поскольку сходное распределение продукта реакции может обна
руживаться в некоторых случаях ОМЛ. По этой причине в части современных гематоло
гических клиник эта реакция уже не используется;
- активность неспецифической а-нафтилэстеразы с оценкой чувствительности реак
ции к ингибиции NaF. Диффузная фторидчувствительная а-нафтилэстеразы средней и вы
сокой степени интенсивности характерна для монобластного и моноцитарного лейкозов;
- активность кислой фосфатазы. Позитивная реакция на этот энзим обнаруживается в
90% случаев Т-ОЛЛ.