Упрощенная HTML-версия
элюируют с сорбента растворителем и затем определяют подходящим методом
количественного анализа.
Используют несколько способов определения компонентов пробы:
1.
По площади зон, полученных на хроматограмме.
2.
По измерению физических и физико-химических свойств зон.
3.
Экстрагированием зон соответствующим растворителем и анализом экстракта.
Анализ методом ТСХ включает следующие стадии: подготовку пластинок с тонким
слоем сорбента, выбор системы растворителей, подготовка камеры для
хроматографирования, растворов анализируемого образца и "свидетелей", нанесение проб
подготовленных растворов на пластинку. Затем следует непосредственно процесс
хроматографирования и обнаружения зон компонентов смеси на хроматограмме с
помощью специальных реагентов или в УФ свете. После чего проводят анализ
хроматограмм и делают заключение о качественном составе исследуемого раствора.
ТСХ обладает универсальностью, доступностью, экспрессностью, легкостью
проведения анализа, эффективностью. Метод является фармакопейным и используется не
только для идентификации Л.В., но и для анализа их чистоты. Например, определение
чистоты препарата нитразепам.
ТСХ обладает важным преимуществом по сравнению со многими другими
методами анализа – высокой чувствительностью. Этим методом можно определить 10-20
мкг вещества с точностью 5%.
Пример применения ТСХ : определение гидрохинона в сточных водах
Определение гидрохинона основано на разделении компонентов сточной воды при
их движении по слою сорбента за счет различной сорбируемости, дальнейшем
перенесении полученного розового пятна окисленного гидрохинона в приемник и
фотометрическим определением количественного содержания гидрохинона.
Для концентрирования нелетучих фенолов, содержащихся в сточной воде,
используют экстракцию эфиром. В качестве подвижного растворителя используют смесь
ацетона, диэтиламина и хлороформа в определенных соотношениях.
Для проведения ТСХ используют промышленную пластину Silufol (силуфол).
Техника безопасности. Работа производится только в вытяжном шкафу. Не пользо-
ваться никакими нагревательными приборами. Нагрев только горячей водой. Температура
воспламенил диэтилового эфира 9,4 °С.
Приготовление подвижного растворителя. Смешивают строго в указанной
последовательности 14 мл ацетона, 14 мл диэтиламина, 28 мл хлороформа. Растворитель
готовят непосредственно перед использованием.
Приготовление раствора для промывания экстрактов
100 г хлористого натрия смешивают с 25 г карбоната натрия, растворяют в
дистиллированной воде и доводят объем раствора до 500мл.
Подготовка пластины "Силуфол"
Пластинку делят на полоски 1,5-15 см.
Методика выполнения хроматографического разделения
Подготовка пробы и проведение экстракции
Пробу сточной воды анализируют сразу после отбора, хранение свыше 4 часов
недопустимо.
В коническую колбу помещают 100-200 мл сточной воды, добавляют 2,5 мл
концентрированной серной кислоты до получения рН = 1-2, насыщают раствор в колбе
хлористым натрием, тщательно перемешивают и переносят содержимое колбы в
делительную воронку, добавляют 20 мл эфира и встряхивают 5 минут, изредка открывая
краник, чтобы выпустить пары эфира. Дают содержимому отстояться и расслоиться
слоями. Воду сливают в коническую колбу из-под пробы, а эфирный экстракт в чистую