Упрощенная HTML-версия
Если природа разделяемых веществ неизвестна, то систему растворителей
подбирают экспериментально.
Схематично ТСХ можно представить таким образом:
А, В – чистые вещества;
С – смесь веществ А и В.
Для качественного анализа рассчитывают коэффициенты движения R
f
компонентов
смеси и сравнивают их с коэффициентами движения чистых веществ.
R
fi
= l
i
/ h
где
l
i
– коэффициент движения для вещества,
h
– коэффициент движения чистого растворителя.
Совпадение R
f
компонента смеси с R
f
чистого вещества в тех же условиях говорит об
идентичности этих веществ.
Величина R
f
является качественной характеристикой данного вещества для
конкретных условий и зависит от природы НФ, толщины его слоя, природы ПФ,
температуры, длины пробега растворителя.
Для наблюдения зон веществ на хроматограммах иногда используют проявители,
т.е. соответствующие реагенты.
В зависимости от способа подачи растворителя различают
ТСХ с восходящим,
нисходящим, горизонтальным, радиальным элюированием.
Наиболее рапространенным
вариантом является ТСХ с восходящим элюированием. Элюент наливают на дно
хроматографической камеры, плотно закрывающегося сосуда с плоскими стенками.
Нижний край пластины с нанесенной пробой помещают в растворитель. Фронт элюента
перемещается снизу вверх.
Метод ТСХ используют для качественного и количественного определения. В
основе
качественного определения
лежит цветовая идентификация либо
непосредственно на пластине после разделения для окрашенных соединений, либо после
использования какого, либо варианта проявления хроматограммы: опрыскивания ее
специфическим реагентом, дающим окрашенное соединение с определяемым веществом;
введение люминофора с последующим облучением пластины в УФ, в результате которого
пластина флуоресцирует, а разделяемые компоненты проявляются в виде темных пятен.
Количественная оценка
может быть проведена как непосредственно на пластине,
так и после перенесения пятна с пластины в приемник. В последнем случае вещество