Упрощенная HTML-версия
52
Taq-ДНК-полимеразы. Реакционную смесь в объеме 20 мкл покрывали 40
мкл минерального масла. ПЦР проводили на амплификаторе «Терцик»
(«ДНК-Технология», Москва).
Таблица 4
Программы амплификации.
Ген IL-1β
Ген IL-1RN
Полиморфизм C+3953T Полиморфизм C-511T
Полиморфизм VNTR в
интроне 2
95
0
C
3 мин 1 цикл 95
0
C 3 мин 1 цикл 95
0
C
3 мин 1 цикл
95
0
C
10 с
40
циклов
95
0
C 10 с
40
циклов
95
0
C
10 с
40
циклов
60
0
C
10 с
64
0
C 10 с
62
0
C
10 с
72
0
C
15 с
72
0
C 25 с
72
0
C
25 с
72
0
C
2,5мин 1 цикл 72
0
C 2,5мин 1 цикл 72
0
C
2,5мин 1 цикл
20
0
C
Хранение
20
0
C Хранение
20
0
C
Хранение
Исследование полиморфизма гена IL-1RN проводили с помощью ПЦР
с праймерами, фланкирующими полиморфный регион в пределах второго
интрона, в котором находится вариабельное число тандемных повторов – 86
п.н. (variable number of tandem repeats - VNTR). В результате амплификации
определяли фрагменты ДНК размером 438, 524, 610, 696 и 782 п.н. с 2, 3, 4, 5
или 6 тандемными повторами, соответственно. Для удобства анализа, а