47
диагностикум» «Щелочная фосфатаза» (Кат.№:009.004 – 250мл) на
фотоколориметре марки «Photometer-5010»(Германия). Набор включает
реагент №1 (диэтиламиновый буфер, магния хлорид, детергенты,
стабилизаторы) и реагент №2 (n-нитрофенилфосфат).
Принцип метода заключается в измерении скорости образования n-
нитрофенола: n-нитрофенилфосфат +H
2
O –ЩФ --
→
n-нитрофенол+фосфат,
при этом скорость образования n-нитрофенола прямо пропорциональна
активности фермента.
Перед анализом смешивались реагенты №1 и №2
в соотношении 4:1.
Исследование проводилось при температуре 37°С. В кювету фотометра с
толщиной поглощающего слоя 1 см вносились 2 мл рабочего реагента и
0,05мл исследуемой слюны, тщательно перемешивались, и через 1 мин
измерялась исходная экстинкция при длине волны 405 нм. Замеры
повторялись через 1, 2 и 3 мин. Вычислялась средняя величина изменения
экстинкции за 1 мин – ∆Е/мин.
Расчет проводился по формуле:
Активность щелочной фосфатазы =
3571 × ∆Е/мин,
где ∆Е/мин – средняя величина изменения экстинкции за 1 мин;
3571 – фактор пересчета (Committee…, 1974).
Оптимальная активность щелочной фосфатазы в ротовой жидкости
лежит в щелочных областях pH, 7,0 и более. Исследование проводилось у 53
человек в возрасте 65-74 года.
2.6. Метод оценки состояния твердых тканей зубов
Изучение структурной однородности внутренних слоев эмали зуба
проводилось методом энерго-дисперсионного спектрального микроанализа с
безэталонным детектором с помощью комбинированного прибора со
специальной электронной машиной «JCOL JSM 6480 LV» (Япония), с
аналитической приставкой фирмы «Oxford» (Англия), а также растрового