46
2.5.4. Определение содержания кальция в ротовой жидкости
Концентрация кальция определялась с помощью фотоколориметра
марки «Photometer-5010» (Германия) и стандартных наборов реагентов
«Ольвекс диагностикум» «Кальций» (Кат.№:018.001–200мл). Набор состоит
из реагентов №1 (буфер), № 2 (хромоген) и калибратора (2,5 ммоль/л)
(Преаналитический…, 1999).
Принцип метода заключается в образовании окрашенного комплекса в
щелочной среде кальция с о-крезолфталеин-комплексоном. При этом
интенсивность окраски пропорциональна концентрации кальция в пробе.
Процедура анализа состоит из подготовки трех проб. Опытная проба
готовилась из 1,0 мл реагента №1, 1,0 мл реагента № 2 и 0,05 мл
исследуемого образца слюны. Калибровочная проба состояла из реагентов
№1 и №2 по 1,0 мл и 0,05 мл калибратора. Контрольная проба
подготавливалась из 1,0 мл реагента №1 и 1,0 мл реагента №2, а также 0,05
мл бидистиллированной воды. Все пробы тщательно перемешивались и
инкубировались в течение 5 минут при комнатной температуре. Затем на
автоматическом фотоколориметре измерялась оптическая плотность
опытной и калибровочной проб против контрольной пробы при длине волны
570 нм. Расчет концентрации кальция в исследуемой слюне проводился по
формуле:
С = Е
пробы
/ E
калибр. ×
2,5 ммоль/л,
где Е
пробы
– оптическая плотность опытной пробы;
Е
калибр.
– оптическая плотность калибровочной пробы;
2,5 ммоль/л – концентрация кальция в калибраторе (Barnett R.N., 1973).
Оптимальное содержание кальция в ротовой жидкости составляет 1,45
ммоль/л. Исследование проводилось у 53 человек.
2.5.5. Определение активности щелочной фосфатазы
Изучение активности щелочной фосфатазы в ротовой жидкости
проводилось с помощью стандартных наборов реагентов «Ольвекс
