Диссертация. Белан Ю.Б. - page 62

62 -
надосадочнойжидкости. Воставшемсяобъеметщательнопипетиро-
валиоадокигомогенуюсуспензиюклетокнаносилинахорош
обезжиреноестекло. Мазоквысушивалинавоздухе, азатона
фиксировалиметиловымспиртом. Окраокумазковпроводилимети­
ловымзеленым. Указаныйметодокраскипозволя исключитьпри
подсчетерозеткобразуодихклетокрозетки, образованыеоегменто-
ядернымилейкоцитамиишиоцитами.
Приучетереакци проводилсяподсчетнемене 300 лш!х>-
цитов, споследующимпересчетомколичестварозеткообразущих
клетокна100 лимфоцитовивычислениемабсолютногочислаЕАС-
РСКвX литрекрови. Зарозеткупринималсялимфоцитприсоеди­
нившийнемене 3 эритроцитов.
Определениесубпопуляци В-яимфоцатов, способнойкспон­
таномурозеткобразованиюоэритроцитамимыши(М-РСК), прово­
дилипом е т о д у (284).
Ходреакции. Эритроциты, полученыеотбеспородныхбелых
мшей, триадыотмывалив
8
абуфервяномфосфатамифизиологичес­
комраствореили
в
среде199 при200
^
поХОминутиизних
готовилирабочийрастворсконцентрациейХхХеРвI мл. Водном
рабочемрастворемышиныхэритроцитовобычноиспользовались
эритроцитыот2-3 мшей. 0,1 мллим*оцптошшювекавконцентра­
ци
2
x
1
сРклеток/шсмешивалисравнымобъемомвзвесимышиншс
эритроцитовиклеткиосавдалицентрифугированиемпри200 ^ 5
минут. Затемпробиркиоставлялинахолодупри+4°СпаХ
20
минут.
После
Холодовой
инкубаци изфиксированыхклетокготовилимаз­
ки, вкоторыхопределялиУ-PQK. Зарозеткупринималсялимфоцит,
присоединивший
тольконеизмененыеэритроцитымыши. Функциональ­
нуюактивностьВсистемыимунитетаоценивалипоуровнюсыворо­
точныхимуноглобулиновосновныхкласов. Определениеимуно­
глобулиновосуществлялосьметодомпростойрадиальнойиммушдиф-
фузи вгелепоМаячили, согласноприлагаемомунаставлениюпо
1...,52,53,54,55,56,57,58,59,60,61 63,64,65,66,67,68,69,70,71,72,...223
Powered by FlippingBook