взвесьюэритроцитовбыкатремяинъекциямивкраевуювенууха
втечение16 часов: 10 ш припервойинъекци ипо5
т
через
6
и16 часов. Заборкровиукроликовосуществляличерез7 су
токпослепервойинъекци. Титрантиэритроцитарныхантител
определяливпытанойсывороткереакциейгемагглютинащш. В
v
качествекомплементаиспользоваласьсвопаясывороткабеспород
ныхбелыхмышей#
Дляполученияиндикаторныхэритроцитовк2 щ 2,5$ взвеси
отмытыхэритроцитовбыкадобавляли
2
млкроличейантисыворотки
воубаглютинациономразведени ивзвесьинкубировали30 мин.
при37°С, встряхиваячерез5-7.минут. Затемвзвесьдваэдыот
мывалисредой199 ш 5 мин, при200 ^ иосадокреоуспевдирова-
лив2 млсреды199. Кэтомуобъектукомплексаантиген-антито-
лодобавляли
2
млмышишойсывороткивкачествекомплемента,
разведенойвотношени
1 : 1 0
ивзвесьвновьинкубироваливтер
мостатапри37°С30 минут. So окончаниюинкубированияэритро
цитыбыка, нагруженыекроличьимиантителамиикомплементом,
отмывали
2
разапо5 минутпри
200
cj.иосадокразводилив
1 0
ш среды199. Конечнаяконцентрацияприготовленойтакимобра
зомвзвесиравна0,5$ растворуэритроцитов.
Ходреакции. Суспензиюлимфоцитов(
0 , 1
мл) соединялис
0,1 мл0,5$ взвесисенсибилизированыхэритроцитовбыкаиклет
киоразу
т
осацдалицешрифугированиемпри200 ^ 5 минут. По
окончаниюцентрифугированияобразовавшиесярозеткификсирова
ливтечение
20
минутприкомнатнойтемпературе. Вкачестве
фиксаторавпробиркидоюавляли0,05 ш 3$ раствораглутарового
альдегидавфофатномбуфере(рН«7,4). Конечнаяконцентрация
альдегидаприэтомравна
0
,
6
$. Фиксациярозетокпрекращалась
добавлением3 млводы. Клеткидополнительноосацдалицентри
фугированиемпри
10 0
о, иизпробирокотсасывалибольшуючасть
