тельных средах.
Обязательным условием для их роста являет
ся наличие в среде
X
и
V
факторов.
На кровяном агаре, приготовленном на основе лошадиной
или кроличьей крови, гемофильные палочки могут расти в виде
мельчайших точечных колоний. Для выделения
Н.influenzae
из
клинического материала рекомендуется использовать шоколад
ный агар или селективный агар для гемофил.
Шоколадный агар приготавливается добавлением крови к
обогащенной агаровой основе, имеющей температуру около 80°С,
для того чтобы разрушить эритроциты и высвободить X и V фак
торы. При этом следует избегать чрезмерного и/или длительного
нагревания для предупреждения инактивации термолабильного V
фактора. Для улучшения ростовых свойств питательной среды
рекомендуется в охлажденный до температуры 45-50°С шоко
ладный агар добавлять НАД
Недостатком шоколадного агара является невозможность на
блюдать гемолитические свойства гемофил, которые позволяют
дифференцировать
H.haemolyticus
и
H.parahaemolyticus
от
Н.influenzae
и
H.parainfluenzae.
Для селективного выделения гемофил из клинического мате
риала используют питательные среды, содержащие бацитрацин.
Высокая концентрация этого антибиотика подавляет рост боль
шинства других микроорганизмов, являющихся представителями
микрофлоры дыхательных путей (стафилококков, микрококков и
стрептококков), что позволяет получить рост гемофильной па
лочки из сильно контаминированного клинического материала.
Оптимальными условиями инкубации
Н. influenzae
являются
влажная атмосфера с повышенным содержанием С 02 (5-10%) и
температура 35-37°С. Подобные условия могут быть созданы в
С02-термостате или при инкубации чашек в эксикаторе с за
жженной свечой. В результате горения свечи уменьшается кон
центрация кислорода и повышается уровень С02, достигая 3%.
Выделение
Haemophilus influenzae
из клинического мате
риала
При окраске по Граму бактерии рода
Haemophilus
выглядят
как мелкие, бледно окрашенные грамотрицательные палочки не
большого размера, клеточный полиморфизм. Для быстрой диаг
ностики инфекций, вызванных
Н. influenzae
типа Ь, разработаны