8
аномальных цитологических изменений у больных с нормальной
кольпоскопической картиной и для иммуноцитохимического исследования.
Цервикальный образец получали при помощи комбинации цервикальных щеток
cytobrush и cervеx-brush. Для традиционного цитологического исследования
материал наносили на обезжиренные предметные стекла с последующей
фиксацией. Для исследования методом жидкостной цитологии клеточный
материал шейки матки при помощи цервикальной щетки, собирали в виалы с
транспортной средой и после центрифугирования и получения тонкослойного
образца исследовали в лаборатории. Окраска стекол проводилась по
Папаниколау с последующей интерпретацией цитологических образцов по
терминологической системе Бетесда (2001г.).
Кольпоскопическое исследование
проводилось всем пациенткам с
использованием кольпоскопа «SOM 52» Karl Kaps GmbH & Co.KG (Германия)
и кольпоскопа серии КС- 01 с фотоприставкой (Санкт - Петербург). Для оценки
состояния эпителия шейки матки применялся метод расширенной
кольпоскопии с использованием уксусной пробы и пробы Шиллера с
интепретацией кольпоскопических признаков в соответствии с Международной
кольпоскопической классификацией (Барселона, 2003г.). Для унификации
кольпоскопических результатов использовали кольпоскопический индекс R.
Reid (2003) и клинико–кольпоскопический индекс M.Shafi and S. Nazeer (2006)
с определением балльной оценки.
Гистологическое
исследование
биоптатов
шейки
матки
и
эндоцервикальных образцов (после прицельного забора материала)
проводилось в патоморфологической лаборатории БУЗОО «КОД» (главный
врач – С.Н. Орлов). Гистологический материал биоптатов шейки матки
фиксировался в 10% растворе формалина (на фосфатном буфере при рН 7,2 -
7,4) и подвергался обработке в гистологическом аппарате карусельного типа
STP-120 (Microm, Германия). Серийные срезы толщиной 4 мкм из парафиновых
блоков, окрашивались гематоксилином и эозином с последующим
микроскопированием полученного образца.
Пациенткам всех исследуемых групп проводилась оценка инфекционного
статуса шейки матки при помощи
молекулярно-биологических методов
исследования
в Академическом центре лабораторной диагностики (зав.
центром - д.м.н., профессор Т.И. Долгих).
Детекция Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, вируса простого
герпеса (HSV), Ureaplasma species проводилась методом
полимеразной цепной
реакции (ПЦР)
(АмплиСенс FL, «ИнтерЛабСервис», Москва).
Детекция ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) (16, 18, 31, 33, 35,
39, 45 , 51, 52, 58, 59) и низкого риска (6, 11) выполнялась методом ПЦР
(АплиСенс ВПЧ ВКР скрин-FL, АплиСенс 6/11–Eph, «ИнтерЛабСервис»,
Москва). Количественная оценка ВПЧ 16 и 18 типов определялась методом
ПЦР в режиме реального времени
с использованием тест–системы «АмплиСенс
R–V12 (RG, iQ, Mx) скрин-титр FRT» (г. Москва). В зависимости от уровня
выделяли низкую, среднюю и высокую вирусную нагрузку.