Упрощенная HTML-версия
(Петрова С.В., Райхлина Н.Т., 2000). Описанные выше функции Р53 делают его удобным
инструментом для характеристики клеточного повреждения, а значит и для опосредованного
определения потенциала клеток к запуску апоптоза. При исследовании маркеров Ki-67 и P53
появляется возможность охарактеризовать обновление клеточной популяции и выявить
отклонения в механизмах регуляции клеточного цикла. Эти данные могут иметь значение для
идентификации начальных стадий патологических изменений, которые могут не выявляться
клинически, что имеет место при хроническом гингивите.
Материалы и методы. Материалом исследования послужили биоптаты десны, взятые в
области десневого сосочка у 16 пациентов с хроническим пародонтитом в разные стадии
заболевания.
Гистологические методы.
Кусочки ткани фиксировали в 10%-ном растворе
формалина на фосфатном буфере (рН 7,2-7,4) в течение 18-24 часов и заключали в парафин по
общепринятой методике. Приготовленные срезы толщиной 5 мкм окрашивались
гематоксилином и эозином и использовались для иммуногистохимических реакций.
Иммуногистохимические методы.
Выявляли экспрессию P53 («Novokastra», England, RTU-P53-
DO7), Ki-67 («Novokastra», England, RTU-Ki-67-MM1). Для иммунного окрашивания
использовали стрептавидин-биотиновый пероксидазный метод («DAKO», Denmark, LSAB2
System, HRP).
Морфометрические методы.
Применяли окулярную вставку в виде квадратной сетки на
100 квадратов, шагом 0,01мм, которой проводили подсчет удельного объёма многослойного
плоского эпителия (Vv) каждого препарата при увеличении 140 в 10 полях зрения. Принимая
узлы сетки за точки, подсчитывали количество точек попавших на акантотические тяжи к
общему числу точек попавших на препарат (Гуцол А.А., Кондратьева Б.Ю., 1988; Автандилов
Г.Г., 2000). Подсчитывали количество позитивно окрашенных клеток в случайных 5 полях
зрения при 300-кратном увеличении микроскопа. Полученные данные пересчитывали на 1 мм2
среза.
Статистические методы.
Использовали непараметрические критерий для оценки
достоверности различий между сравниваемыми группами (критерий Краскела-Уоллиса) и для
выявления корреляционных связей (коэффициент ранговой корреляции Спирмена). Обработку
данных проводили с использованием программы “Primer of Biostatisyics v.4.03”.
Результаты.
У 7 пациентов гистологическая картина хронического гингивита
соответствовала фазе прогрессирования. В этой группе при окраске гематоксилином и эозином
были выявлены признаки активного воспалительного процесса, характеризующиеся резким
увеличением нейтрофильных лейкоцитов воспалительного инфильтрата, их выраженной
миграцией в пласт эпителия с формированием эрозивных дефектов или нарушением
структурной целостности. Показатель удельного объема эпителия для данной группы составил
ри исследовании гистологическая картина была
охарактеризована как стадия с минимальнойстепенью активности воспаления. Определялись
признаки продуктивной реакции, проявляющиеся в доминировании мононуклеарной
инфильтрации, как в пределах собственного слоя, так и наличием единичных клеток
интраэпителиально, при этом встречались единичные нейтрофильные лейкоциты,
преимущественно в пласте эпителия. В этой группе показатель удельного объема эпителия
истологическом
исследовании определялась стадия регресса воспалительного процесса. Скудный,
исключительно мононуклеарный инфильтрат располагался в собственной пластинке слизистой
оболочке
десны.
Показатель
удельного
объема
эпителия
составил
Vv
=
0,69±0,11м
Полученные данные говорит об отсутствие достоверных отличий показателя удельного
объема эпителия в сравниваемых группах (критерий Краскела-Уоллиса H=3,324; число степеней