Стр. 201 - 2

Упрощенная HTML-версия

604 Strubelt O., Obermeier F., Siegers С Acta pharmacol. et toxicol. 1978, v. 43, N 3, p. 211-218
TappelA. Pathobiology of cell membranes. New York, 1975, v. l,p. 145-150
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗУЧЕНИЮ ПРЕПАРАТОВ, ОБЛАДАЮЩИХ СВОЙСТВАМИ
АНТИОКСИДАНТОВ И ХЕЛАТОРОВ
ВВЕДЕНИЕ
В последнее десятилетие установлено, что важным патогенетическим фактором
процесса старения, мутагенеза, химического канцерогенеза, развития ряда тяжелых
заболеваний является избыточное образование в организме активных форм кислорода (АФК),
получившее название оксидативного стресса. Поэтому ведется поиск препаратов, способных
предотвратить или ослабить повреждения, вызываемые оксидативным стрессом.
Генерация АФК в организме осуществляется двумя путями. Первый путь-
ферментативный. Он приводит к образованию супероксидных анион-радикалов - О 2 у
пероксида водорода — Н 2 О 2 и др. Второй путь - каталитический. Он заключается в
трансформации под влиянием ионов железа и других переходных металлов тех АФК,
которые синтезированы ферментами, и приводит к образованию наиболее агрессивных АФК,
например, гидроксильных радикалов - НО Г
В связи с этим особенно перспективными могут стать те препараты, которые
блокируют оба этих пути, т.е. обладают способностью и антиоксидантов, и хелаторов ионов
железа. Методические рекомендации предлагают надежный и быстрый способ первичного
отбора препаратов, характеризующихся указанными сочетанными свойствами.
Формула метода.
Новизна метода заключается в том, что в качестве индуктора
используются волокна асбеста, которые не только стимулируют ферментативную
кислородзависимую бактерицидную систему фагоцитов, генерирующую АФК, но и
вызывают их вторичную каталитическую трансформацию на Fe 2+ , содержащемся в
пограничном слое волокна. Предложены математические формулы определения
эффективности антиоксидантов и хелаторов.
МАТЕРИАЛЬНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ МЕТОДА
Реактивы и оборудование.
При осуществлении метода используются следующие
реагенты:
1. Стандартный набор реактивов для биохимической лаборатории;
2. Реагенты для измерения хемилюминесценции в суспензии клеток:
а) люминол, пероксидаза хрена, трипановый синий (фирма Сигма);
б) гепарин натрия, эфир медицинский, перекись водорода раствор;
в) хлорид натрия (NaCI), дигидрат хлорида магния (MgCI 2 , x 2Н 2 О), дигидрат
двузамещенного фосфата натрия(Na 2 HPO 4 x2H 2 O);
г) волокна хризотил-асбеста Баженовского месторождения (ТУ - 31-02-22-87).
3. Стандартное оборудование лаборатории молекулярной биологии.
Приборы.
Для измерения хемилюминесценции может быть использован разрешенный
для применения в медицинской практике (Приказ МЗ СССР № 413 от 12.07.1989 г.)