Упрощенная HTML-версия
Б. Экспериментальные фиброз и цирроз печени
Фиброз и цирроз печени у крыс моделируют применением СС1 4 (самостоятельно или
совместно с этанолом) или тиоацета-мида. СС1 4 вводят дважды в неделю либо
внутрибрюшинно в дозах 0,5-1 мл/кг в течение 5-10 недель, либо подкожно в дозах 0,25-2
мл/кг в течение 3-6 мес. Ускорить формирование хронического патологического процесса в
печени возможно потенцированием гепатотоксического эффекта СС1 4 с помощью этанола.
По этой методике СС1 4 вводят в желудок по 0,1 мл/кг дважды в неделю в течение 4 недель,
этанол - в виде 5% раствора в качестве питья вместо воды - на протяжении всего опыта.
Тиоацетамид вводят ежедневно внутрибрюшинно в дозах 50-100 мг/кг 1-2 мес. или в желудок
25 мг/кг 2-4 мес. Помимо рассмотренных выше показателей в гомогенатах печени
определяют содержание пролина, оксипролина; фракций нейтральносолерастворимого,
кислотораство-римого и кислотоустойчивого коллагена, активность пролингидроксилазы,
количество гликозаминогликанов и гликопротеинов. Большое значение имеет
морфогистохимическоеисследование
печени,
включая
выявление
компонентов
соединительной ткани. В сыворотке крови измеряют содержание гликозаминогликанов и
гликопротеинов.
В. Исследование гепатозащитного эффекта
в культуре гепатоцитов
Исследования проводят на изолированных гепатоцитах (в том числе на
культивируемых раздельно центролобулярных и пе-рипортальных клетках), в среду
инкубации которых помещают растворимые в воде гепатопротекторы (примерная
концентрация для индивидуальных веществ составляет 0,01-1 мг/мл) и гепатотоксины (СС1 4
- 2-4 ммоль, парацетамол 1,75-10,4 ммоль, D-галак-тозамин 1,85-3,5 ммоль, тиоацетамид 1,35-
5,3 ммоль, аллиловый спирт 100-175 мкмоль, акролеин 1,5-5 ммоль, гидразин 8-20 ммоль.
Определяют показатели жизнеспособности гепатоцитов (см раздел 1) а также исследуют
морфологию клеток, биотрансформацию в них ксенобиотиков, процессы липопероксидации,
транспорт ионов. Корреляция между антигепатотоксическим действием in vivo и in vitro
может отсутствовать.
Для оценки мембраностабилизирующего эффекта потенциальных гепатопротекторов
исследуют их способность повышать резистентность эритроцитов к осмотическому и
механическому повреждению и предотвращать развитие гемолиза.
3. ОЦЕНКА ОБЩЕТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ
И СПЕЦИФИЧЕСКИХ ВИДОВ ТОКСИЧНОСТИ
Исследуют влияние гепатопротекторов на основные органы и системы в условиях
хронического эксперимента, а также возможные мутагенные, канцерогенные, аллергогенные,
иммунотоксические эмбриотоксические и тератогенные свойства.
Предлагаемая схема позволяет провести доклинические испытания перспективных
гепатопротекторов, исключив уже на ранних этапах исследования препараты, недостаточно
активные или токсичные, что значительно экономит время и средства.