43
ток может являться мерой микобактериальной нагрузки и ис-
пользоваться для диагностики туберкулеза. Новые подходы к ди-
агностике латентного и активного туберкулеза основаны именно
на определении количества (частоты) клеток, продуцирующих
ИФН-
(тест T-SPOT), и / или количества ИФН-
, продуцируемо-
го клетками периферической крови после их стимуляции in vitro
антигенами M.tuberculosis
(Quantiferon Gold) (A. Lalvani,
K.A. Millington, 2008; M. Pai, A. Zwerling, D. Menzies, 2008;
G. Ferrara, M. Losi et al., 2005; G. Ferrara, M. Losi et al., 2006),
при постановке реакции рекомендуется короткое время экспо-
зиции – 24 часа, поэтому тест в основном используется как
скрининговый при отборе для более детального обследования
на туберкулез, что не исключает получения ложноотрицатель-
ных результатов. В отечественной практике данные тесты не
используются (В.И. Киселев с соавт., 2008), поэтому оценить
чувствительность и специфичность данных тестов не возможно.
С целью оптимизации методов ранней диагностики туберку-
лезной инфекции в наших исследованиях специфический иммун-
ный ответ оценивали, помимо модифицированной реакцией
бластной трансформации лимфоцитов при стимуляции туберку-
лином (мРБТЛ с ППД-Л), по уровню γ-интерферона после стиму-
ляции туберкулином (γINF с ППД-Л) (приоритетная справка 2011
110 673 от 21.03.11 «Способ оценки активности туберкулеза у де-
тей и подростков»). Из полученных контрольных культур и куль-
тур клеток с ППД-Л отбирали супернатанты (надосадок) по 0,05
мл, объединяли в общий контрольный (0,15мл) и общий опытный
образец (0,20мл), которые в дальнейшем использовали для коли-
чественного определения гамма-интерферона спектрофотометри-
чески с помощью ИФА с использованием тест-систем, предна-
значенных для определения гамма–интерферона в супернатантах.
Отличительными признаками предлагаемого способа является:
использование культурального надосадка, возможность исполь-
зования малого объема крови (200 мкл) и время экспозиции 96
часов.
Оценку уровня ИФН-
проводили по определению индекса
стимуляции. При показателе индекса стимуляции менее 7,0 диа-
гностировали отсутствие активной туберкулезной инфекции, при