Упрощенная HTML-версия
8
Механизм ПЦР (Компоненты реакционной смеси,
циклический температурный режим, «Эффект плато»)
Рис. 1. Механизм ПЦР
Компоненты реакционной смеси
Праймеры, Taq-полимераза, смесь дезоксинуклеотидтрифос-
фатов (дНТФ) дезоксиаденозинтрифосфата (дАТФ), дезоксигуа-
нозинтрифосфата (дГТФ), дезоксицитозинтрифосфата (дЦТФ),
идезокситимидинтрифосфата (дТТФ), буфер, анализируемый об-
разец.
Циклический температурный режим
(денатурация, отжиг, элонгация (синтез)
Денатурация.
На первом этапе необходимо расплести двой-
ную цепь ДНК, находящуюся в образце. Для этого реакционную
смесь нагревают до 92-95°С, в результате чего двухцепочечные
молекулы ДНК расплетаются с образованием двух одноцепочеч-
ных молекул. Отжиг. На втором этапе праймеры присоединяются
к одноцепочечной ДНК-мишени. Этот процесс носит название