Упрощенная HTML-версия
3.4. Физиологические особенности возбудителей
Анаплазмы и эрлихии являются медленно растущими микроорганизмами, размножаются
поперечным бинарным делением, с наличием вегетативных (ретикулярных) и покоящихся
(элементарных) клеток, аналогично хламидиям. Представители родов
Anaplasma, Ehrlichia,
Neorickettsia
и
Wolbachia
являются облигатными внутриклеточными протеобактериями,
размножающимися в специализированных вакуолях (фагосомах или эндосомах)
эукариотических клеток, обозначаемых как «морулы». Возбудитель МЭЧ размножается в
моноцитах и макрофагах, возбудитель ГАЧ – в гранулоцитах (нейтрофилах). Представители
семейства обладают механизмом, препятствующим слиянию фагосом с лизосомами. Они
имеют осмотически активную клеточную мембрану, содержащую специфические
переносчики для транспорта субстратов.
Свободные от клеток хозяина
N.risticii
и
N.sennetsu
способны усваивать L-глютамин, но
не глюкозу или глюкозо-6-фосфат, что показывает неспособность к классическому
гликолитическому пути.
Лабораторное поддержание представителей семейства связано с культивированием на
специальных линиях клеток – макрофагоподобные клетки гистиоцитомы собак (DH82) и
лейкемии человека (линия HL60), в некоторых случаях – эпителиоидноподобные клетки
(линии эндотелиальных клеток человека, клетки Vero, HeLa). Накопление анаплазм в них
происходит медленно и незначительно, поэтому используют длительно культивируемые
линии с выдерживанием клеточных культур до месяца и более с периодической сменой
поддерживающей питательной среды. Для размножения
N.sennetsu
можно использовать
белых мышей, у которых наблюдается генерализованная инфекция с накоплением
возбудителя в селезенке и макрофагах перитонеальной жидкости.
3.5. Устойчивость к факторам внешней среды
Конкретная устойчивость представителей семейства к факторам внешней среды изучена
недостаточно, можно лишь предполагать, что они существенно не отличается по этим
параметрам от риккетсий. Анаплазмы устойчивы к неблагоприятным условиям внешней
среды.
Anaplasma marginale
сохраняется в цитратной крови при температуре 3 – 50С до 94 –
104 дней, в глюкозо-сахарозо-цитратном растворе при той же температуре 334 дня. В
цитратной крови анаплазмы сохраняют свою патогенность до 82 дней. Выживаемость и
патогенность анаплазм при сохранении in vitro зависит от того, в начале или в конце
заболевания была взята кровь и насколько сильно была выражена клиника анаплазмоза у
овцы – донора. Наиболее продолжительно анаплазмы сохраняются в крови, взятой на высоте
паразитарного приступа у тяжело больных анаплазмозом овец.
3.6. Антигенная структура
На первом этапе изучения было установлено отсутствие общих антигенных детерминант
эрлихий с риккетсиями сыпнотифозной и клещевой групп, коксиеллами Бернета и
боррелиями Бургдорфера, однако в дальнейшем показана перекрестная реактивность белков
теплового шока HSP60 у риккетсий и анаплазм. У представителей семейства
Anaplasmataceae
имеются общие антигенные детерминанты, обусловливающие наибольшую перекрестную
реактивность внутри видов (геногрупп), что позволило в свое время диагностировать МЭЧ с
использованием антигена
E.canis
. Использование техники вестерн-иммуноблота позволило
выявить семь главных белков – 120, 66, 58, 44, 29, 28 и 22 КД, наибольшимнабором
антигенов обладает
E.canis
. С использованием техники моноклональных антител и
моноспецифических поликлональных антител продемонстрировано, что главные,
иммунодоминантные белки 120, 29, 28 и 22КД, а также минорный 30 КД белок являются
поверхностными протеинами, а белки 28 и 22 КД антигенно взаимосвязаны. ДНК-