Упрощенная HTML-версия
случаев болезни Брилля сокращается, что находит свое отражение в резком сокращении
регистрируемой заболеваемости.
2.13. Микробиологическая диагностика риккетсиозов
Лабораторная диагностика сыпного тифа и других риккетсиозов включает выделение
возбудителя, определение его антигенов и ДНК, выявление антител к риккетсиям
соответствующих видов, чаще осуществляется с использованием серологических (РСК,
РНГА, РНИФ, ИФА) и молекулярно-генетических (ПЦР, определение нуклеотидных
последовательностей фрагментов генов) методов.
Выделение возбудителей риккетсиозов от больных наиболее эффективно в острый
лихорадочный период, до начала антибиотикотерапии. Основные риккетсиологические
методы включают заражение, чаще интраперитонеальное, чувствительных животных
(морские свинки, хомячки, хлопковые и белые крысы, белые мыши), развивающихся
куриных эмбрионов (в желточный мешок по Коксу), перевиваемых культур клеток (Vero,
HeLa, Hep-2, L929), клеток членистоногих.
Животным и при заражении куриных эмбрионов вводят дефибринированную кровь или
суспензию растертых на физиологическом растворе сгустков крови, биопсийного материала
кожи, а также других тканей больного в зависимости от формы поражений.
При заражении клеточных культур используют плазму, гепаринизированную (или
обработанную ЭДТА) кровь, биопсийный материал. Целесообразно выделение возбудителя
не только от больного, но и из переносчиков (клещи, блохи, вши).
Эффективно риккетсиологическое обследование снятых с человека переносчиков
классическими (выделение возбудителя) и экспресс – (метод флюоресцирующих антител,
ИФА, РНГА с иммуноглобулиновыми диагностикумами для выявления антигенов риккетсий
групп СТ и КПЛ) методами.
Для биопроб используют молодых, весом 300-350 г морских свинок-самцов. Заражение
проводят внутрибрюшинным введением 3-5 мл крови или 10% суспензий материалов,
содержащих риккетсии (сгустки крови и органы человека и животных, членистоногие) двум-
трем животным. У животных ежедневно измеряют ректальную температуру. После
инкубационного периода от нескольких дней до нескольких недель у морских свинок
развиваются различные формы экспериментальных риккетсиозов (лихорадочные,
лихорадочно-скротальные, бессимптомные). При заражении
R.rickettsii,
реже –
O.tsutsugamushi
и
C. burnetii
у морских свинок может возникать летальная инфекция.
Наиболее характерным для риккетсиозов проявлением экспериментальной инфекции у
морских свинок-самцов при внутрибрюшинном заражении является скротальный феномен –
периорхит с накоплением риккетсий во влагалищных оболочках яичка. В ряде случаев может
возникать специфический перитонит, риккетсии накапливаются в эндотелиальных клетках
кровеносных сосудов различных органов и тканей (тестикулы, мозг, селезенка,
надпочечники). Животных вскрывают на высоте лихорадки, одно из биопробных животных
оставляют для серологического исследования (как правило через 3 – 4 недели после
заражения).
При всех формах инфекционного процесса у биопробных животных выявляют антитела к
антигенам риккетсий в различных серологических реакциях (РА, РСК, РНИФ, ИФА).
Используют цельно-растворимые и корпускулярные антигены из штаммов различных видов
риккетсий. В большинстве серологических реакций отмечается выраженная перекрестная
реактивность внутри групп (СТ и КПЛ). Для анализа антигенной структуры риккетсий чаще
используют гипоиммунные сыворотки белых мышей и корпускулярные антигены.
При пассажах штаммов риккетсий на морских свинках наиболее часто используют 10%
суспензии головного мозга и яичек, в ряде случаев также селезенок, надпочечников, реже –