Упрощенная HTML-версия
3. Способы регуляции активности ферментов.
4. Аллостерические ферменты, механизм их регуляторного действия.
5. Ингибирование ферментов: обратимое и необратимое, конкурентное и
неконкурентное. Механизмы действия конкурентного и неконкурентного ингибиторов,
примеры. Лекарственные вещества как ингибиторы ферментов.
Лабораторная работа №1:
«ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФАКТОРОВ
НА АМИЛАЗНУЮ АКТИВНОСТЬ СЛЮНЫ»
Принцип метода.
Метод основан на сравнении скорости гидролиза крахмала под
действием амилазы слюны до и после добавления ионов хлора и меди. Продукт гидролиза
крахмала обнаруживают пробой с йодом.
Ход работы.
В первую пробирку вносят 1 мл дистиллированной воды, во вторую 1 мл
1% раствора хлорида натрия, в третью – 1 мл раствора сульфата меди (2). Затем в каждую
пробирку добавляют по 1 мл разведенной слюны (1:9). Содержимое пробирок перемешивают,
добавляют по 2 мл раствора крахмала и оставляют стоять при комнатной температуре 5
минут.
После инкубации во все пробирки вносят по 1-2 кап. раствора йода. Наблюдают
окрашивание в зависимости от степени расщепления крахмала амилазой. В первой пробирке
появляется фиолетовая или красно-бурая окраска, во второй пробирке, где ионы хлора
играют роль активаторов, появляется желтая окраска, а в третьей пробирке, где ионы меди
угнетают действие амилазы слюны, окраска остается синей.
Результаты заносят в таблицу, и делают вывод о действии изученных веществ.
Таблица 8
Влияние различных факторов на амилазную активность слюны
№
пробирки
Модификатор
активности
Разведенная
слюна
(мл.)
Раствор
крахмала
(мл.)
Результат
(окрашивание)
1
1 мл воды
1
2
2
1 мл хлорида
натрия
1
2
3
1 мл сульфата
меди
1
2
Типовые вопросы компьютерного контроля
1. Основные этапы ферментативного катализа обозначены в виде схемы:
1 2 3
Е + S → Е –S → Е- S * → Е + Р
Что характерно для 2-го этапа ферментативной реакции?
1) увеличивается комплементарность между субстратом и активным центром
фермента
2) связывание субстрата с контактными группами активного центра фермента
3) расслабление химических связей субстрата под действием каталитических
групп активного центра, что приводит к значительному снижению энергии активации