Упрощенная HTML-версия
нитрат кобальта образует окрашенный продукт с азокрасителем пиридоксина в
водно-ацетоновой среде при рН 7 с максимумом поглощения при 515—520 им.
2. Обнаруживают кобальт также после сплавления цианокобаламина или
гидроксокобаламина с гидросульфатом калия. Затем открывают ион кобальта
реакцией с нитрозо-R-солью (динатриевой солью 1- нитрозо-2-нафтол-3,6-
дисульфокислоты). Образуется внутрикомплексное соединение кобальта, имеющее
красный цвет
3. Ион кобальта можно также обнаружить после выпаривания и прокаливания
0,25 мг цианокобаламина с 10 мг сульфата калия и 2 каплями 15%-ной серной
кислоты. К остатку
прибавляют насыщенный раствор роданида аммония в ацетоне; появляется сине-
зеленое окрашивание:
4. Для отличия гидроксокобаламина от цианокобаламина используют
специфичную на реакцию с раствором карбоната лития в пикриновой кислоте.
Выполняют также реакцию на хлориды.
5. В УФ-спектре:
цианокобаламин
- наличие максимумов поглощения 0,002%-
ного водного раствора при 278, 361 и 550 нм.
Раствор
кобамамида
в 0,03 М растворе ацетата натрия имеет максимумы
поглощения при 260 и 375 нм, а также максимум в видимой области спектра при 522
нм.
Растворенный в ацетатном буфере (рН 4,5)
гидроксокобаламин
имеет в области
250-550 нм три максимума поглощения при 274, 351 и 525 нм. Отношение
поглощения при 525 нм к таковому при 351 нм от 0,3 до
0,35, а при 274 нм к 351 нм от 0,75 до 0,85.
Чистота
. 1. Для испытания чистоты цианокобаламина и его аналогов также
используют УФ-спектрофотометрию.
Для
цианокобаламина
устанавливают отношение величин оптической плотности
при 361 ни и 278 им (1,7—1,88), а также при 361 им и 550 им (3,15—3,40).
Для установления наличия поглощающих примесей измеряют оптическую
плотность 0,002%-ного раствора
кобамамида
в 0,003 моль/л растворе натрия ацетата
в максимумах при длинах волн 260, 280, 375 и 522 им. Величины отношений
оптических плотностей должны быть при длине волны 280 нм к 260 нм от 0,6 до
0,65; при 375 нм к 260 нм от 0,28 до 0,33; при 522 нм к 260 нм от 0,21 до 0,26.
NaO
3
S
NO
OH
SO
3
Na
NaO
3
S
N
O
SO
3
Na
Co
O
3
C o
3
3+
3+
Co
2+
+ 2 NH
4
NCS Co(NCS)
2
+ 2 NH
4
+