Упрощенная HTML-версия
концентрированной кислоты азотной предложил русский ученый Нелюбин А.П.
Этот метод сыграл большую роль в развитии химико-токсикологического анализа.
Однако
разрушение
биологического
материала
при
нагревании
с
концентрированной HNO
3
требует большой затраты времени, реагент слабо
окисляет жиры. В дальнейшем в
качестве окислителя использовалась
концентрированная кислота серная, действующая одновременно и как
дегидратирующий агент. Однако, этот процесс тоже был весьма продолжительным
по времени, и в процессе минерализации образовывались неразлагающиеся
обуглившиеся остатки. Для устранения этих недостатков в 1821 году М.Ж.Орфила
предложил применять смесь концентрированных серной и азотной кислот. Этот
метод был модифицирован и применен для целей химико-токсикологического
анализа в 1908 году П.К. Равданикисом. До настоящего времени этот, метод
находит применение в практике Бюро СМЭ и является по сути дела основным
методом минерализации.
Метод минерализации смесью концентрированных серной,
азотной кислот и воды (1:1:1)
Процесс разрушения биологического объекта протекает в 2 стадии:
1.
Стадия деструкции,
на которой происходит разрушение биологических
субстратов организма (белков, жиров, углеводов) на составные части: белки
разрушаются до аминокислот, углеводы (полисахариды) до ди- и моносахаридов
жиры до глицерина и жирных кислот. Менее всего подвержены разрушению на
первой стадии жиры. На первой стадии нагревание не должно быть сильным, чтобы
избежать подгорания объекта или сильного пенообразования и выброса частиц
объекта из колбы. Поэтому, в начале процесса колбу Къельдаля закрепляют над
плиткой на расстоянии 1-2 см. Температура не должна превышать 110°С. Эта
стадия непродолжительна по времени, длится от 15 до 40 минут. По окончании
деструкции получается прозрачная желтовато-бурая жидкость, иногда с пленкой
жира, т.к. на этой стадии все элементы объекта разрушены, кроме жиров.
На стадии деструкции концентрированная H
2
SO
4
выполняет роль
водоотнимающего средства, что приводит к нарушению структуры клеток и тканей,