Упрощенная HTML-версия
Обнаружение карбоксигемоглобина в крови является доказательством
отравления угарным газом. Для обнаружения и количественного
определения СО используют химические, газохроматографические,
фотоколориметрические, спектрофотометрические и спектроскопические
методы анализа.
1. Спектроскопический метод.
При исследовании крови
спектроскопом в спектре можно увидеть тёмные полосы поглощения
определённых длин волн для гемоглобина и его производных. В судебно-
медицинской практике часто используют микроспектроскоп (спектроскоп,
соединённый с окуляром).
Оксигемоглобин в видимой части спектра имеет две полосы
поглощения при длинах волн 577-589 и 536-556 нм. Карбоксигемоглобин
также имеет две полосы поглощения при 564-579 и 523-536 нм.
Кровь для исследования разбавляют водой до светло-розовой окраски
(чётко видны спектральные полосы). К четырём объёмам водного
раствора крови добавляют 1 мл свежеприготовленного раствора аммония
сульфида или другого восстановителя. При этом оксигемоглобин
восстанавливается до дезоксигемоглобина - исчезают полосы поглощения
оксигемоглобина и появляется широкая полоса поглощения
дезоксигемоглобина при длинах волн 543-596 нм. Карбоксигемоглобин
при этом не восстанавливается и его полосы поглощения не исчезают. По
этим полосам делают заключение об отравлении СО.
Спектроскопический метод можно использовать при содержании в
крови от 10% до 30% карбоксигемоглобина.
2. Спектрофотометрическое определение.
Кровь в количестве 0,1
мл растворяют в 10 мл аммиака, наливают в кювету и измеряют
оптическую плотность (D) при длинах волн 578 и 564 нм. Содержание
карбоксигемоглобина в крови рассчитывают по формуле:
%СОНb = (1,70- D
578
/D
564
):(1,70 -0,75) 100