4. Количественное определение алкалоидов
проводится
фотометрическим и
спектрофотометрическим методами (в видимой и УФ-областях спектра).
1. Определение в УФ-области (200-400 нм) проводится по специфическому
поглощению (абсорбции) самого алкалоида при наличии у него хромофорной
системы. Интенсивность поглощения пропорциональна концентрации. Расчет ведут по
уравнению закона Бугера-Ламберта-Бера.
Определение проводится на спектрофотометре, т.к. закон Бера справедлив только
для монохроматического излучения.
2. Определение в видимой области (400-700 нм) основано на измерении
абсорбции окрашенных комплексов алкалоидов с кислотными реагентами
(пикриновой кислотой, тропеолином 00, метиловым оранжевым, бромфеноловым
синим и т.п.). В этом случае образуются ионные ассоциаты, для образования
которых большое значение имеет
рН
среды, т.к. в момент реакции и алкалоиды, и
реагенты должны быть ионизированы. Окрашенные ионные ассоциаты могут быть
экстрагированы из водной фазы органическим растворителем. Такое определение
носит название экстракционно-фотометрического.
Окрашенные продукты могут быть получены также в реакциях окисления,
восстановления, конденсации, азосочетания и некоторых других.
Измерение абсорбции можно вести как на фотоэлектроколориметрах, так и на
спектрофотометрах.
Расчет концентрации проводится по градуировочному графику. При
использовании спектрофотометрии можно использовать уравнение Бугера-Ламберта-
Бера.
Фотометрические методы анализа позволяют определять очень малые (несколько
микрограммов) количества алкалоидов, но требуют высокой степени чистоты
выделенного вещества, поэтому сочетаются с ТСХ- очисткой полученных извлечений.
АЛКАЛОИДЫ, ПРОИЗВОДНЫЕ ТРОПАНА
5.5.1. АТРОПИН