Упрощенная HTML-версия
высокая оценка информативности обнаружения в крови противотуберкулезных антител
методом ИФА в случаях первичного выявления туберкулеза (С.В.Некрасов, 1999). В
исследованиях С.В.Некрасова доказано, что уровень противотуберкулезных антител у детей,
инфицированных МБТ достоверно меньше по сравнению с больными туберкулезом
внутригрудных лимфатических узлов, при этом чувствительность ИФА у инфицированных
23,2%, а у больных туберкулезом внутригрудных лимфатических узлов 88,8%.
Преимуществом данного теста является комплексная оценка специфических
иммуноглобулинов класса М, класса G, класса А, что позволяет определить активность
инфекции, ее раннюю стадию или затихающий процесс, а также определить ее реактивацию
или признаки инфицирования.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
ПЦР относится к молекулярно-генетическим
методам исследования и в настоящее время широко используется для обнаружения
M.tuberculosis (отражает факт наличия или отсутствия антигена). Принцип метода состоит в
циклическом повторении трех стадий реакции:
1. денатурации ДНК при нагревании;
2. гибридизации искусственно синтезированных олигонуклеотидов с фланговыми
участками цепей амплифицируемого фрагмента ДНК (так называемых «праймеров»
или «затравочных» фрагментов);
3. синтеза (достройки) цепи фрагмента ДНК с помощью термостабильной ДНК-
полимеразы. Многократное удвоение цепей ДНК (30-40 циклов) позволяет в течение
нескольких часов умножить (амплифицировать) специфический участок ДНК в
геометрической прогрессии, а затем идентифицировать его (при электрофорезе в
агарозном геле в присутствии красителя этидия бромида синтезированный фрагмент
ДНК выявляется в виде светящейся под действием ультрафиолета полосы).
Высокая чувствительность (теоретически возможно определять единичные
M.tuberculosis в образце) и быстрота проведения анализа (1-2 дня) чрезвычайно ценны для
клинической практики. Проблема специфичности ПЦР в диагностике туберкулеза
обусловлена высоким риском ложноположительных результатов, поскольку продукты
амплификации (фрагменты ДНК) легко могут попасть в исследуемые образцы и служить
матрицей для новых реакций. По данным И.Б.Викторова и А.Л.Ханина (2003)
чувствительность ПЦР 14,3%, специфичность 87,5%.
По результатам исследования Е.А.Марениной ДНК МБТ методом ПЦР в крови
определяли у 59,3% детей с усиливающейся туберкулиновой чувствительностью и у 60,9%
детей при гиперергических реакциях на пробу Манту с 2 ТЕ. В группах риска по результатам
27