К ПФ предъявляются следующие требования:
1.
Хорошее растворение пробы,
2.
Невысокая вязкость,
3.
Химическая инертность в материалам хроматографа,
4.
Возможность определения на данном детекторе.
Растворители.
Элюирующая сила растворителя
определяется полярностью
растворителя (элюента). В нормально - фазовой хроматографии элюирующая сила
растворителя растет с увеличением его полярности, расположение растворителей в
соответствии с возрастанием их элюирующей силы называется
элюотропным рядом
Снайдера,
который приведен в разделе 13.2..
Основные стадии проведения ВЭЖХ: анализируемую смесь растворяют в
подвижной фазе, с помощыо дозатора или микрошприца вводят в специальное устройство
прибора. Туда же подается под определенным давлением и с определенной скоростью
подвижная фаза. По мере продвижения подвижной фазы с растворенными в ней
веществами за определенный промежуток времени на колонке происходит разделение
смеси. Чем больше сродство компонента к неподвижной фазе и чем меньше к подвижной,
тем медленнее он движется по колонке и тем дольше в ней удерживается. Анализ
проводится в определенном режиме температур, что создается с помощью устройства для
термостатирования.
Обработка полученных результатов проводится вручную или с помощью
компьютерных программ.
Применение ЖАХ и ВЭЖХ в медицине и фарманализе.
ЖАХ и ВЭЖХ широко применяются для идентификации, разделения и
определения разных веществ, а также в технологическом и фармакопейном контроле
качества лекарственных субстанций и лекарственных форм. Например, методом ВЭЖХ
анализируют кофеин, лидокаина гидрохлорид, парацетамол, и т.д.
Метод ВЭЖХ имеет в настоящее время огромное влияние на развитие биохимии,
биомедицины, фармакологии, контроля окружающей среды, криминалистических
исследований.
13. Хроматографические методы анализа
13.7. Ионообменная хроматография
В основе ионообменной хроматографии лежит обратимый стехиометрический
обмен ионов, содержащихся в растворе, на ионы сорбента, который называется ионитом
(ионообменником).
Разделение смеси ионов основано на неодинаковой способности различных ионов к
обмену и с ионами ионита. По знаку обменивающихся ионов иониты делятся на
катиониты и аниониты. Существуют также амфотерные иониты – амфолиты.
Иониты
– это синтетические смолы, способные набухать при поглощении воды
или органических растворителей. Иониты имеют пространственную структуру и
представляют собой каркасы. Иными словами, структура смолы напоминает губку с более
равномерными отверстиями.
Иониты представляют собой нерастворимые органические или неорганические
соединения, которые могут быть естественного или искусственного происхождения.
Наибольшую практическую значимость имеют иониты органической природы -
фенолформальдегидные смолы, производные полистирола получаемые на основе реакций
полимеризации или поликонденсацли. В зависимости от характера ионогенных групп
иониты делятся на катиониты и аниониты.