чает, что в него будет включаться так же мало метки ,4С-гипоксантина.
Так, по литературным данным, после инкубации человеческих или
овечьих эритроцитов с ,4С-гипоксантином радиоактивность АТФ и ГТФ
составляла всего лишь около 2% от радиоактивности ИМФ [122]. В работе
[92] было установлено, что скорость включения 14С-гипоксантина в ГТФ
изолированных крысиных сердец составляет в нормоксических условиях
25% от его включения в АТФ, а после ишемии - 27%, и это при том, что
содержание ГТФ составляет только 4% от содержания АТФ. Добавление в
перфузионный раствор 0,5 тМ рибозы при нормоксии и после ишемии
значительно сильнее увеличивало включение 14С-гипоксантина в ГТФ,
чем в АТФ. Еще пример того, что реутилизация гипоксантина сильно
варьирует в разных опытах: в мозге после ишемии включение ,4С-гипок-
сантина в гуаниновые нуклеотиды составляло менее 1% от включения в
адениновые [101].
Нередко исследователями используется следующий методический
прием: после раздельного определения содержаний пуриновых производ
ных вычисляют суммарное содержание мононуклеотидов, суммарное со
держание нуклеозидов и азотистых оснований (НАО) и используют эти
суммы в качестве обобщенных показателей (см. напр. [31, 124]). В работе
[112] был предложен иной подход, основанный на определении тканевого
содержания и радиоактивности суммарных пулов адениновых производ
ных (АТФ + АДФ + АМФ + аденозин + аденин), гуаниновых производных
(ГТФ + ГДФ + ГМФ + гуанозин + гуанин) и производных гипоксантина
(инозинтрифосфат + инозиндифосфат + ИМФ + инозин + гипоксантин)
без предварительного определения каждого отдельного вещества. Среди
областей применения предложенного метода авторы называют изучение
реутилизации ,4С-гипоксантина и синтеза пуринов de novo.
Мы определяли включение 14С-гипоксантина в пулы пуриновых мо
нонуклеотидов, выделяемые по другому принципу: НДТФ, НМФ и НАО.
Обоснованием такого деления является то, что, во-первых, реутилизация
гипоксантина (или другого пуринового основания) до стадии НМФ и до
стадии НДТФ представляют собой два разных этапа процесса реутилиза
ции, поэтому целесообразно изучать их раздельно. Во-вторых, НДТФ и
НМФ различаются по своему биохимическому значению: первые являют
ся макроэргами, вторые - нет. В-третьих нуклеозиддифосфаты и нуклео-
зидтрифосфаты целесообразно объединять в один пул, поскольку их взаи
мопревращения между собой резко превосходят по интенсивности мета
болические реакции между НДТФ и НМФ.
В настоящей работе для моделирования пуринового обмена в голов
ном мозге в качестве факторов были взяты:
-
общая радиоактивность хлорнокислого экстракта мозга (выраженная
в импульсах счета на секунду счета и на грамм сырой массы ткани, со
46