Упрощенная HTML-версия
54
«Литех», Россия). Выделение ДНК осуществляли с помощью системы «ДНК-
экспресс кровь» (НПФ «Литех», Россия). Этапы выделения и амплификации
Рис.10. Генотипирование полиморфного локуса C+3953T гена IL-1β в 1,5%
агарозном геле.
ДНК выполнялись в соответствии с требованиями, указываемыми
производителем. Наборы «SNP-экспресс» предназначены для проведения
аллель-специфической ПЦР, поэтому для каждого исследуемого образца
выполнялась амплификация с двумя парами праймеров (комплементарными
нормальному или полиморфному аллелю) в двух пробирках. Результаты
оценивали по наличию или отсутствию амплифицированной ДНК. При
наличии амплифицированной ДНК только в пробирке с праймерами,
комплементарными нормальному аллелю, генотип оценивался как
гомозиготный по нормальному аллелю, при наличии амплифицированной
ДНК только в пробирке с праймерами, комплементарными полиморфному
аллелю – как гомозиготный по полиморфному аллелю, при амплификации
ДНК в обоеих пробирках – как гетерозиготный.
Анализ продуктов амплификации проводили с помощью электрофореза
в 3% агарозном геле, приготовленном на основе 10% TАE-буфера с
бромистым этидием (рис. 11).
К+
2R/2R
К+
4R/4R